[发明专利]红豆杉紫杉醇活性提取物的提取方法

权利要求书

1.一种红豆杉紫杉醇活性提取物的提取方法，其特征是，包括以下工艺步骤：

（1）将红豆杉枝叶粉碎至20-50目，加入3-5倍量的石油醚与正己烷（2-3：1）的混合物，于0-5℃下放置10-12小时，过滤得到滤渣；

（2）滤渣置于提取釜中，加入6-10 倍红豆杉枝叶体积的85-95%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为4-5小时，过滤得到滤液，滤液PH调为中性；滤渣加入3-5倍量的55-65%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为4-5小时，过滤得到滤液，滤液PH调为中性；滤渣再加入3-5倍量的40-45%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为10-15小时，过滤得到滤液；

（3）合并每次过滤的滤液得到粗提取液；

（4）将粗提取液进行0-5℃下低温减压浓缩得到粗浸膏；将粗浸膏溶于35-50℃的热水中，粗浸膏与热水的体积比为1∶2-3；

（5）向热水中加入乙酸乙酯进行萃取，浸膏与乙酸乙酯的体积比为1∶2-3，萃取多次，合并乙酸乙酯萃取液；将乙酸乙酯萃取液减压浓缩得到含有紫杉醇的乙酸乙酯浸膏；

（6）将含有紫杉醇的乙酸乙酯浸膏同硅胶混合制备干样，填充干样到硅胶200-300目的色谱柱上端，用乙酸乙酯-甲醇（2：1）混合液淋洗，淋洗液流出色谱柱后，分段收集馏分，按段将紫杉醇含量为10-30%之间的淋洗液馏分集中起来，经浓缩、干燥，得到中间产品；

（7）将紫杉醇含量低于10%的淋洗液馏分，集中起来重复步骤（6）；

（8）将步骤（6）得到的中间产品用乙腈溶解，用高压液相色谱分离，色谱柱为C18硅胶填料，流动相为乙腈和水，而后将分离后含紫杉醇的流动相进行蒸发，干燥，得到高纯度紫杉醇。