[发明专利]红豆杉活性提取物的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从红豆杉科(Taxaceae) 红豆杉属(Tasus) 植物中提取活性提取物。

背景技术

红豆杉是一种珍贵的药用植物，为世界珍稀濒危树种，国家一级保护植物，被誉为“植物黄金”。南方红豆杉枝叶的次生代谢代谢产物中，其药用价值中除含有极少量的紫杉醇成分已在临床上广泛用于治疗各种恶性肿瘤，被认为是最好的抗癌药之一。现有提取活性成分工艺破坏性大，必须改进。

发明内容

本发明的目的是提供一种红豆杉活性提取物的提取方法，提取条件温和，其紫杉醇提取物的得率达到0.2-0.3%。

本发明的技术方案如下：

一种红豆杉活性提取物的提取方法，其特征是，包括以下工艺步骤：

(1)    将红豆杉枝叶粉碎至20-50目，加入3-5倍量的石油醚，于5-15℃下放置10-12小时，过滤得到滤渣；

(2)    滤渣置于提取釜中，加入8-10 倍红豆杉枝叶体积的85-95%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为4-5小时，过滤得到滤液，滤液PH调为中性；滤渣加入3-5倍量的55-65%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为4-5小时，过滤得到滤液，滤液PH调为中性；滤渣再加入3-5倍量的40-45%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为10-15小时，过滤得到滤液；

(3)    合并每次过滤的滤液得到粗提取液，脱去甲醇得到浸膏；

(4)    浸膏用乙酸乙酯与丙酮混合液（1：1-2）进行萃取，浸膏与混合液的体积比为1∶2-3，萃取多次，合并萃取液；将萃取液减压浓缩得到含有紫杉醇、10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ、三尖杉宁碱的乙酸乙酯浸膏；

(5)    脱去溶剂，得到红豆杉活性提取物。

本发明采用工艺，采用低温浸提，不同浓度梯度甲醇浸提，极大地保护了紫杉醇，使其在分离过程中不发生转化，紫杉醇作为一种生物大分子物质，受温度、有机溶剂、酸、碱等环境条件的影响，易降解或异构生成其它紫杉烷类物质。如紫杉醇在强酸性或弱碱性环境条件下会降解为巴卡亭III或发生表位异构生成7-表紫杉醇；温度较高时也会发生降解反应，生成相应的小分子物质。本发明工艺大大提高了紫杉醇的得率。

具体实施方式

一种红豆杉紫杉醇活性提取物的提取方法，包括以下工艺步骤：

(1)    将红豆杉枝叶（干叶3000g）粉碎至20-50目，加入5倍量的石油醚，于0-5℃下放置10-12小时，脱脂，过滤得到滤渣；

(2)    滤渣置于提取釜中，加入8-10 倍红豆杉枝叶体积的90%的甲醇进行提取，提取液温度为-7- -5℃，提取时间为4-5小时，过滤得到滤液，滤液PH调为中性；滤渣加入5倍量的55%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为4-5小时，过滤得到滤液，滤液PH调为中性；滤渣再加入5倍量的45%的甲醇进行提取，提取液温度为-10--5℃，提取时间为15小时，过滤得到滤液；

(3)    合并每次过滤的滤液得到粗提取液；

(4)    合并每次过滤的滤液得到粗提取液，脱去甲醇得到浸膏；

(5)    浸膏用乙酸乙酯与丙酮混合液（1：1）进行萃取，浸膏与混合液的体积比为1∶2，萃取多次，合并萃取液；将萃取液减压浓缩得到含有紫杉醇、10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ、三尖杉宁碱的乙酸乙酯浸膏；

脱去溶剂，得到红豆杉活性提取物11.2克，，其中含有2.1%紫杉醇、4.2%10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ、1.9%三尖杉宁碱。经过色谱证实与标准品为同一物。