[发明专利]重金属胁迫下白腐真菌胞内活性巯基化合物的定量检测方法

权利要求书

1.重金属胁迫下白腐真菌胞内活性巯基化合物的定量检测方法，包括以下步骤：

（1）将白腐真菌孢子加入培养液中振荡培养至白腐真菌的对数生长期；

（2）向上述所含白腐真菌处于对数生长期的培养液中添加重金属溶液，继续振荡培养至设定的取样时间，将培养物过滤分离并用0℃～4℃的缓冲液洗涤，得到菌丝球；

（3）将上述菌丝球与0℃～4℃的缓冲液混合，然后将得到的混合液用冰水浴超声破碎得到匀浆液，再对匀浆液进行冷冻离心，最后取上清液作为样品；

（4）采用含5, 5’-二硫基-2-硝基苯酸溶液的方法测定上述样品的吸光度，计算出样品中活性巯基化合物的含量。

2.根据权利要求1所述的定量检测方法，其特征在于，所述步骤（1）和步骤（2）中振荡培养的条件为：温度34℃～38℃，转速120r/min～150r/min。

3.根据权利要求1所述的定量检测方法，其特征在于，所述重金属溶液为含镉、铅、铜、铬中一种或几种的重金属溶液。

4.根据权利要求3所述的定量检测方法，其特征在于，所述重金属溶液为含镉溶液，其中镉离子的浓度为2mg·L^-1～25mg·L^-1。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的定量检测方法，其特征在于，所述缓冲液为含有EDTA的六偏磷酸钠溶液。

6.根据权利要求5所述的定量检测方法，其特征在于，所述缓冲液中六偏磷酸钠的质量与溶液体积之比为5%～7%，EDTA的浓度为1～3mmol·L^-1，缓冲液的pH值为2.6～2.9。

7.根据权利要求1～4中任一项所述的定量检测方法，其特征在于，所述步骤（3）中冰水浴超声破碎的条件为：超声功率500w～700w，总超声时间4min～7min，单次超声持续3s～4s，单次超声间隔8s～9s。

8.根据权利要求1～4中任一项所述的定量检测方法，其特征在于，所述步骤（3）中冷冻离心的条件为：温度0℃～4℃，转速9000r/min～11000r/min，持续时间15min～20min。