[发明专利]在仓鼠细胞中定点重组的组合物和方法有效
申请号: | 201310082124.4 | 申请日: | 2013-03-14 |
公开(公告)号: | CN103305504A | 公开(公告)日: | 2013-09-18 |
发明(设计)人: | 凌建群;苏会敏;姜超;凤阁 | 申请(专利权)人: | 江苏吉锐生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/113;C12N5/10 |
代理公司: | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 | 代理人: | 邬玥;葛强 |
地址: | 210036 江苏省南京市汉中门大*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 仓鼠 细胞 定点 重组 组合 方法 | ||
1.分离的多核苷酸,其含有高表达位点的至少7个连续核苷酸,其中所述高表达位点存在于仓鼠细胞的染色体或基因组中。
2.如权利要求1所述的分离的多核苷酸,其中所述高表达位点选自下组:CHO-Genome.iTS1到CHO-Genome.iTS25。
3.低聚化合物,含有可特异性杂交于靶位点的靶区域,所述靶位点含有高表达位点的至少7个连续核苷酸,其中所述高表达位点存在于仓鼠细胞的染色体或基因组中。
4.如权利要求3所述的低聚化合物,其中所述靶位点含有所述高表达位点的3’→5’链的至少7个连续核苷酸,所述高表达位点选自下组:CHO-Genome.iTS1到CHO-Genome.iTS25。
5.如权利要求3所述的低聚化合物,其中所述靶位点含有所述高表达位点的5’→3’链的至少7个连续核苷酸,所述高表达位点选自下组:CHO-Genome.iTS1到CHO-Genome.iTS25。
6.如权利要求3-5任一所述的低聚化合物,进一步含有能够与第二低聚化合物结合的结合区域,所述结合区域与靶区域连接。
7.如权利要求6所述的低聚化合物,其中所述第二低聚化合物含有第二靶区域和第二结合区域。
8.如权利要求7所述的低聚化合物,其中所述第二靶区域与第二靶位点特异性杂交,所述第二靶位点含有在仓鼠细胞染色体或基因组中存在的高表达位点的至少7个连续核苷酸,其中所述第一靶位点和所述第二靶位点在所述高表达位点的相反链上。
9.低聚构建体,含有:
第一低聚化合物,其含有与第一结合区域连接的第一5’→3’靶区域;
第二低聚化合物,其含有与第二结合区域连接的第二3’→5’靶区域;以及
在第一结合区域和第二结合区域之间的结合;
其中:
所述第一5’→3’靶区域与第一3’→5’靶位点可特异性杂交;所述第二3’→5’靶区域与第二5’→3’靶位点可特异性杂交;且
所述第一3’→5’靶位点和所述第二5’→3’靶位点各含有高表达位点的至少7个连续核苷酸,其中所述高表达位点存在于仓鼠细胞的染色体或基因组中。
10.如权利要求9所述的低聚构建体,其中所述第一5’→3’靶区域与所述第一3’→5’靶位点有50%到100%互补性,和/或所述第二3’→5’靶区域与所述第二5’→3’靶位点有50%到100%互补性。
11.如权利要求9所述的低聚构建体,其中所述第一3’→5’靶位点含有所述高表达位点的3’→5’链的至少7个连续核苷酸,所述高表达位点选自下组:CHO-Genome.iTS1到CHO-Genome.iTS25。
12.多核苷酸供体,含有第一5’→3’同源位点,所述同源位点含有高表达位点的5’→3’链的至少7个连续核苷酸的同源序列,其中所述高表达位点存在于仓鼠细胞的染色体或基因组中。
13.多核苷酸供体,含有第一3’→5’同源位点,所述同源位点含有高表达位点的3’→5’链的至少7个连续核苷酸的同源序列,其中所述高表达位点存在于仓鼠细胞的染色体或基因组中。
14.如权利要求13所述的供体,其中所述供体进一步含有第二5’→3’同源位点,其含有所述高表达位点的5’→3’链的至少7个连续核苷酸的同源序列。
15.如权利要求12-14任一所述的供体,其中所述高表达位点选自下组:CHO-Genome.iTS1到CHO-Genome.iTS25。
16.如权利要求14所述的供体,进一步含有外源序列,所述外源序列两端侧接有所述第一3’→5’同源位点和所述第二5’→3’同源位点。
17.试剂盒,含有:
如权利要求6所述的两个低聚化合物,其能够形成如权利要求9所述的低聚构建体;
以及
如权利要求14所述的多核苷酸供体,
其中所述低聚构建体可与所述供体的所述第一同源位点和所述第二同源位点特异性杂交。
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