[发明专利]一种甘草多糖的提取方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及甘草渣深加工技术，具体是甘草多糖的提取方法及应用。

背景技术

随着人们生活水平和生活质量的不断提高，卷烟消费已经向品牌消费转变，尤其是高档卷烟市场，消费者对卷烟的健康、风味也提出越来越高的要求。生产低焦油、低危害的卷烟已成为我国乃至世界卷烟行业发展的重要方向之一。目前，降低卷烟危害采用的主要技术路线有两条：一种是“降焦”，即通过降低卷烟焦油的释放量使有害成分同时降低，即协同性降低卷烟烟气有害成分；另一种是“减害”，即采用特殊技术和添加功能性因子以达到降低卷烟烟气中部分有害成分，而对其他成分作用较小的目的，即选择性降低卷烟烟气中有害成分。烟草凝集物（CSC）对人支气管上皮BEAS-2B细胞的细胞毒性是评价卷烟安全性的一项重要指标。目前已有多篇文献报道CSC诱导人支气管上皮BEAS-2B细胞凋亡并探讨了其作用途径和机理。目前尚未见降低烟草凝集物（CSC）对人支气管上皮BEAS-2B细胞的细胞毒性的方法。

甘草为多年生草本，主要分布于新疆、青海、甘肃等地。甘草具有益气补中、缓急止痛、润肺止咳、泻火解毒和调和诸药的作用，广泛应用于医药和食品行业。目前我国甘草主要用于生产甘草浸提物、甘草酸及其衍生物，甘草渣是甘草加工的副产物。长期以来,工业化生产只对甘草中的甘草甜素(又名甘草酸)作为主要有效成分进行提取,而提取甘草酸后的甘草渣则被当作废弃物遗弃,造成了环境污染和资源浪费。由于加工技术手段限制，目前我国甘草渣还没有得到充分利用，或用于养殖饲料，或作为肥料直接填埋回土地。近年来，甘草渣的深加工利用成为国内研究的热点和重点。授权专利（专利号201010242200.X）采用甘草渣为原料制备烟草薄片，并发现烟草薄片添加到烟草中具有无焦油含量、一氧化碳释放量较低、明显增香和减少卷烟刺激感的作用。授权专利（专利号201010111656.2）公开了一种从甘草废渣中提取降血糖活性成分的方法。发明（申请号200510119580.7）公开了一种从甘草废渣中提取甘草酸的方法。发明（申请号02109474.8）公开了一种从甘草废渣中提取甘草黄酮的方法。目前尚未见以甘草渣或甘草为原料，制备具有降低卷烟的烟草凝集物(CSC)细胞毒性功能性甘草多糖的报道。

发明内容

本发明的目的是填补目前关于应用甘草多糖降低卷烟烟草凝集物（CSC）对人支气管上皮BEAS-2B细胞的细胞毒性方法的空白，提供一种甘草多糖的提取方法及应用。将本发明制备的甘草多糖加入到卷烟中，所得卷烟的烟草凝集物对人支气管上皮BEAS-2B细胞存活率显著高于空白样品，具有正面作用。

本发明同时提供了在卷烟中添加甘草多糖降低卷烟烟草凝集物（CSC）对人支气管上皮BEAS-2B细胞的细胞毒性的应用。

本发明的目的通过如下技术方案予以实现：

一种甘草多糖的提取方法，其包括如下步骤：

（1）甘草渣除沙洗净，晾干后粉碎得甘草渣原料；

（2）在甘草渣原料中加入有机酸溶液，于110-120℃下提取2-5小时，过滤，分离甘草渣提取液，用氢氧化钾调节提取液pH值至6.5-7.0；

（3）将步骤（2）所得的提取液用截留分子量5000道尔顿的膜进行超滤，收集截流液部分；

（4）将超滤透过液进行真空浓缩，至原来体积的1/7~1/3，得浓缩液；

（5）在浓缩液中加入乙醇，混合均匀后，在0-4℃下静置1-3小时，过滤，除去上层清液部分，得多糖沉淀；

（6）收集沉淀物，冷冻干燥，获得甘草多糖。

进一步改进的，步骤（1）所述甘草渣粉碎至40-100目。

进一步改进的，步骤（2）所述有机酸溶液为柠檬酸或苹果酸中任意一种，且溶液的pH值为1.0-3.0。

进一步改进的，步骤（2）所述有机酸溶液的用量按甘草渣原料重量的20-40倍加入。

进一步改进的，步骤（5）所述乙醇添加量满足混合均匀后乙醇最终浓度为75-90%（v/v）。

进一步改进的，步骤（5）所述多糖沉淀用乙醇浸洗2-3次。

进一步改进的，步骤（6）所得沉淀物进行冷冻干燥，得浅黄色甘草多糖。

上述方法得到的甘草多糖在卷烟中的应用，具体是按照烟丝质量的0.05-0.2%的比例，通过喷洒方式将其添加到烟丝或过滤嘴中。

本发明采用了以上技术方案，具有如下的优点和有益效果：