[发明专利]一种烟草中麦草畏残留量的测定方法

权利要求书

1.一种测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1）提取烟草中的目标物

称取烘干磨好的烟叶样品，加入纯水浸润，依次加入氘代内标，乙腈和甲酸，涡漩混合振荡；放入冰箱冷冻后取出，依次加入无水硫酸镁，氯化钠，柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠，涡旋振荡后离心；

2）N-丙基乙二胺纯化

移取上清液于新的离心管中，加入无水硫酸镁及PSA吸附剂，于漩涡振荡混合，然后高速离心；吸取上清液经有机相滤膜过滤，移取滤液，并用乙腈和超纯水稀释后待测；

3）标准储备液和标准工作液的配制

用乙腈配置麦草畏标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，-20℃保存；取一定量的储备液进行混合，用乙腈稀释定容，制得混合标准储备液；

用乙腈准确配置麦草畏-d₃氘带内标标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，-20℃保存；取一定量的内标储备液进行混合，用乙腈稀释定容，制得混合内标标准储备液；所有的储备液于冰箱-20℃，使用前将其恢复到室温；

用国际烟草科学研究合作中心空白烟叶的萃取基质配制不同浓度的麦草畏标准工作溶液；

4）液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定：吸取空白烟叶溶液和配制好的不同浓度的麦草畏标准工作溶液，注入LC-MS/MS系统，按内标法以峰面积计算出样品待测液中麦草畏含量。

2.根据权利要求1所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，所述烟叶的重量为2g。

3.根据权利要求2所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，步骤1）中所述冷冻时间为10min，冷冻温度为-18至-15℃。

4.根据权利要求3所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，步骤1）中提取过程依次加入的超纯水，氘代内标，乙腈和甲酸的体积分别为10mL，20L，10mL和200L；涡旋振荡1min；离心管在-10℃条件下保持10min；依次加入的无水硫酸镁，氯化钠，柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠的质量分别为4g，1g，1g和0.5g；然后漩涡混合振荡的速率为2000rpm，振荡时间为2min，离心时间为10min。

5.根据权利要求3所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，步骤2）中，加入无水硫酸镁及PSA吸附剂的质量为150mg和25mg。

6.根据权利要求1所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，步骤2）中移取滤液体积为200L，加入乙腈和超纯水的体积为100L和700L。

7.根据权利要求3所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，步骤4）中选取70%甲酸水和30%乙腈初始流动相体系，分析时间为4min，进样量为10μL。

8.根据权利要求7所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，步骤4）中梯度洗脱条件为梯度洗脱条件：0~2min，70%A~10%A；2~3.5min，10%A~10%A；3.5~3.51min，10%A~70%A；3.51~4.00min，70%A~70%A；流动相流速为0.7mL/min。

9.根据权利要求8所述的测定烟草中麦草畏含量的方法，其特征在于，步骤4）串联质谱检测器的条件：ESI-，喷雾电压：2.6kV，雾化气流量：800L/Hr；锥孔气(cone)流量50L/Hr，离子化温度350℃；碰撞气流量为0.15ml/min；碰撞气为氩气，其余气体为氮气；驻留时间为30msec，负离子MRM模式采集。