[发明专利]一种黑麦草种子与农杆菌共培养的转基因技术无效

专利信息
申请号: 201310019032.1 申请日: 2013-01-19
公开(公告)号: CN103031332A 公开(公告)日: 2013-04-10
发明(设计)人: 李杰勤;王丽华;詹秋文;张俊;赵庭;万海波;周青;王茂辉;王薇薇 申请(专利权)人: 安徽科技学院
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;A01H5/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 233100 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 一种 麦草 种子 杆菌 培养 转基因 技术
【权利要求书】:

1.一种黑麦草种子与农杆菌共培养转基因技术的特征在于,以黑麦草种子与农杆菌接种液共同培养实现自动接种,它包括①黑麦草种子消毒,②与菌液共同培养接种,③暗箱培养,④育苗栽培4个步骤。

2.根据权利要求1所述的技术,其特征在于,所述的黑麦草种子消毒的做法是:选取籽粒饱满的黑麦草种子,顺序用乙醇和84消毒液消毒,消毒结束后用灭菌水洗净种子。

3.根据权利要求1所述的技术,其特征在于,所述的与菌液共同培养接种的做法是:将灭菌后的种子转入到OD600为0.3的转入了双元载体的农杆菌接种液中,于恒温震荡培养箱中培养24小时,培养温度为28℃,震荡速度为100rpm。

4.根据权利要求1所述的技术,其特征在于,所述的暗箱培养的做法是:将与菌液共培养后的种子取出置于发芽盒中,6℃恒温暗培养4天,注意保湿。

5.根据权利要求1所述的技术,其特征在于,所述的育苗栽培的做法是:将培养后的种子单粒播到营养钵中,置于22℃下生长,3叶期即可进行转基因植株的鉴定。

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