[发明专利]一种同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法

权利要求书

1.一种同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，所述四种有效成分分别是五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）确定色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，采用由乙腈为流动相A、水为流动相B组成的洗脱液进行梯度洗脱，理论板数按五味子醇甲峰计算不低于5000，梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1---0~20min，流动相A：B=40~65%：60~35%，A+B=100%，流速为1.0ml/min，检测波长为245~255nm；

梯度2----20~35min，流动相A：B=〔(40~65%)→(90~100%)〕：〔(60~35%)→(10~0%)〕，A+B=100%，流速为1.0ml/min，检测波长为220~235nm；

梯度3---流动相A：B=90~100%：10~0%，A+B=100%，流速为1.0~1.3ml/min，检测波长为195~205nm；

（2）制备对照品溶液；

（3）制备供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取适量对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，并按外标法以峰面积计算，即得检测结果。

2.一种同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，所述四种有效成分分别是五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）确定色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，采用由乙腈为流动相A、水为流动相B组成的洗脱液进行梯度洗脱，理论板数按五味子醇甲峰计算不低于5000，梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1-----0~35min，流动相A：B=〔(40~50%)→(90~100%)〕：〔(60~50%)→(10~0%)〕，A+B=100%，流速为1.0~1.2ml/min，检测波长为220~265nm；

梯度2-----流动相A：B=90~100%：10~0%，A+B=100%，流速为1.0~1.3ml/min，检测波长为195~205nm；

（2）制备对照品溶液；

（3）制备供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取适量对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，并按外标法以峰面积计算，即得检测结果。

3.根据权利要求1或2所述的同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，其特征在于，制备供试品溶液时，将供试品细粉置于具塞锥形瓶中，加入甲醇，称定总重量，于40℃温浸1小时后，超声10min，然后放至室温，并再称定总重量，用甲醇补足损失的重量，摇匀并过滤，取续滤液作为供试品溶液。

4.根据权利要求1或2所述的同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，其特征在于，制备对照品溶液时，精密称取五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮对照品，用甲醇溶解并配制成对照品溶液，使每1ml对照品溶液中含有3-7μg五味子醇甲、60-75μg白花前胡甲素、14-20μg白花前胡乙素、5-9μg紫菀酮。

5.根据权利要求4所述的同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，其特征在于，制备对照品溶液时，每1ml对照品溶液中含有5μg五味子醇甲、70μg白花前胡甲素、18μg白花前胡乙素、7μg紫菀酮。

6.根据权利要求1或2所述的同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，其特征在于，当连续进样检测时，追加洗脱时长为5分钟的洗脱梯度，该追加的洗脱梯度将流动相A、B的体积百分比变换为梯度1洗脱时的流动相A、B体积百分比的起始比例，并将检测波长变换到梯度1的起始检测波长。

7.根据权利要求2所述的同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，其特征在于，步骤（1）中梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1----0~35min，流动相A：B=40%→96%：60%→4%，A+B=100%，流速为1.0ml/min，检测波长为250nm，当洗脱15分钟时波长变换为228nm，

梯度2----流动相A：B=96%：4%，A+B=100%，流速为1.2ml/min，检测波长为200nm。

8.根据权利要求2所述的同时检测止咳宝片中四种有效成分含量的方法，其特征在于，所述步骤（1）中梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1----0~30min，流动相A：B=50%→100%：50%→0%，A+B=100%，流速为1.0ml/min，检测波长为228nm，

梯度2----流动相A：B=100%：0%，A+B=100%，流速为1.2ml/min，检测波长为200nm。