[发明专利]一种电泳槽中PAGE胶板的封胶方法无效
申请号: | 201310001797.2 | 申请日: | 2013-01-05 |
公开(公告)号: | CN103008195A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 胡能兵;隋益虎;舒英杰;周玉丽;何克勤;张子学;崔广荣 | 申请(专利权)人: | 安徽科技学院 |
主分类号: | B05D1/30 | 分类号: | B05D1/30 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 233100 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 电泳槽 page 方法 | ||
技术领域
本发明公开了一种电泳槽中PAGE胶板的封胶方法,属于生物技术领域。更具体的说是一种在PAGE凝胶电泳槽中进行PAGE胶板快速封胶的新方法。
背景技术
PAGE凝胶电泳技术是分子生物学的常规技术,主要用于分离DNA、RNA、蛋白质、同工酶等。在分离同工酶时,需要用琼脂溶液对玻璃板与电泳槽的槽壁之间的缝隙进行堵漏封闭,形成胶室,这项工作称之为封胶。封胶工作的质量要求很高,如果封胶不严,加入后续的胶液后就会出现泄漏,称之为漏胶,导致后续的工作无法进行。现有的PAGE板封胶方法的特点是手工布胶,且操作自上而下进行。具体做法是,用移液器吸取琼脂溶液,自上而下沿着槽壁与玻璃板之间的缝隙进行滴加。该方法由于使用手工将琼脂粉液体挤出移液器枪头,难以在封胶全程进行连续均匀操作,加上琼脂粉液体容易凝固的特性,经常会使琼脂粉液体在侧面的中部凝固成疙瘩,留下人的肉眼无法察觉的缝隙,在后续操作中发生造成漏胶,导致返工,费工费料。
发明内容
一种电泳槽中PAGE胶板的封胶方法发明的目的是通过改进封胶操作的方法和流程,使封胶工作不但确保滴胶不漏,而且简便易行,快捷高效,省工省料。
本发明是这样实现的:
1. 一种电泳槽中PAGE胶板的封胶方法包括用琼脂溶液填堵玻璃板与胶室间的缝隙,其特征在于,所述的封胶方法还有先下后上、快速流胶的要求。
2. 所述的先下后上一是指先对胶室的底部的水平缝隙进行封胶,后对胶室纵向的缝隙进行封胶;二是指先对胶室的四个纵缝由下向上进行封胶。
所述的快速流胶一是指先在底部的拐角处堆积琼脂溶液,然后迅速调整电泳槽的摆放角度,使琼脂溶液沿着底部的水平缝隙向一个方向快速流动,溶液所到之处,立即进入缝隙之内,冷却凝聚,将缝隙封闭。如此这般,连续操作,直至底部四周的水平缝隙全部封闭。二是指先在底部的拐角处堆积琼脂溶液,然后迅速调整电泳槽的摆放角度,使琼脂溶液沿着胶室的纵向缝隙由下向上快速流动,溶液所到之处,立即进入缝隙之内,冷却凝聚,将缝隙封闭。如此这般,连续操作,直至胶室的纵向缝隙全部封闭。
在琼脂溶液流动的过程中,如果溶液冷却凝聚,不再流动,即在此点重新加注琼脂溶液,调整电泳槽角度后使之继续同向流动,直至缝隙完全封闭。
本发明的有益效果:一种电泳槽中PAGE胶板的封胶方法适合于需要用琼脂粉进行封胶的PAGE操作,具有以下几个优点:第一,操作简便。本方法摈弃了传统的手工滴加铺胶方式,改用将琼脂溶液集中于胶室底部拐角处然后使之沿着胶室缝隙快速流动的方式封闭胶室上下的缝隙,操作更加简便;第二,由下而上的布胶操作,可以使整个的布胶过程在眼睛的密切注视下进行,能够观测到琼脂溶液沿缝隙流动和进入缝隙的全部细节,并随时调整电泳槽的姿态,使封胶的速度快,效果好;第三,琼脂粉使用量少,封胶效果好。该方法在沿缝隙迅速流动过程中铺胶薄且均匀,不会形成琼脂粉疙瘩,封胶效果好。第四,节省时间。加注琼脂溶液之后,迅速地倾斜电泳槽,使之沿着缝隙流动,操作相当快捷,无需象传统方式边吸取边滴加,可节省时间。
具体实施方式:
下面结合具体实施例对本发明进行进一步的描述。
实施例1:双板夹芯式垂直电泳槽DYCZ-30CPAGE胶板(长*高的规格:105×185mm)的快速封胶
我们用一种电泳槽中PAGE胶板的封胶方法中先下后上,快速流胶的方法进行封胶。首先是先下后上:先对胶室的底部进行封胶,后对胶室纵向的缝隙进行封胶;二是先对胶室的四个纵缝由下向上进行封胶。具体做法是先在底部的拐角处堆积琼脂溶液,然后迅速调整电泳槽的摆放角度,使琼脂溶液沿着底部的水平缝隙向一个方向快速流动,溶液所到之处,立即进入缝隙之内,冷却凝聚,将缝隙封闭。如此这般,连续操作,直至底部四周的水平缝隙全部封闭。然后再在底部的拐角处堆积琼脂溶液,迅速调整电泳槽的摆放角度,使琼脂溶液沿着胶室的纵向缝隙快速流动,溶液所到之处,立即进入缝隙之内,冷却凝聚,将缝隙封闭。如此这般,连续操作,直至胶室的纵向缝隙全部封闭。
在琼脂溶液流动的过程中,一发现溶液冷却凝聚,不再流动,即在此点重新加注琼脂溶液,调整电泳槽角度后使之继续同向流动,直至缝隙完全封闭。
通过以上步骤后,对胶室注水检验,在底部、侧面均无漏水现象发生。
实施例2:单板夹芯式垂直槽-DYCZ-28A胶板(长*高的规格:125×100mm)的快速封胶
按照实施例1中同样的步骤和方法对单板夹芯式垂直槽-DYCZ-28A胶板进行快速封胶。完成后,对胶室注水检验,在底部、侧面均无漏水现象发生。
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