[发明专利]提供过水解酶催化反应的系统

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年12月19日提交的美国申请号61/577,529的优先权，其通过引用以其整体结合到本文中。

发明背景

通常需要使制剂组分在使用前分隔开，因为例如所述组分如果混合，则可能太不稳定而不便于长期贮存。在这种情况下，需要在接近使用时能够以有效又简单的方式将制剂组分混合。

可能需要保持制剂组分分隔开的制剂的一个实例是牙齿增白制剂，其包含反应性成分例如过氧化物或过氧酸或其前体。例如，可能希望将A+B或A+B+C混合以得到不稳定的漂白剂X，但是将A和B保持分隔开直到该时间点。问题出现了，因为在使用期间，混合必须迅速，漂白剂X向牙齿表面的扩散必须是有效的。遗憾的是，混合多种凝胶或其它中等粘性材料一般不是迅速混合化学品的有效方法；如果特定消费者用手混合，则可能产生样品混合良好和混合差的区域。不得不将两种粘性建筑用漆一起进行人工搅拌时，才容易发现以下问题：层流引起颜色存在于相邻条纹中，而不是有效地将两种颜色混在一起。为了直接克服这个问题，可能需要比愿意专注于该项任务的特定使用者更多的时间和混合努力，并且当反应物类X在数分钟内开始分解时，这种方法将难以实施。

因此需要允许成分在接近使用时有效率且有效果地混合的产品。

发明概述

本发明提供多室系统，其中一个室含有低粘度液体溶液，另一个室含有液体、粉料或粉料混合物，各室被易碎的或可撕开的屏障分隔开，使得在挤压一个室时，屏障破碎，各室的组分可混合形成溶液、乳液、悬浮液或可挤出凝胶，其可通过第二室的出口分配，其中低粘度液体溶液包含具有过水解酶(perhydrolase)活性的蛋白质，其含有碳水化合物酯酶家族7签名基序(signature motif)，而且另一个室或多个室含有酰基供体，例如羧酸酯和过氧化物源，使得在各室内容物混合时，具有过水解酶活性的蛋白质催化由过氧化物源释放的过氧化物和酰基供体之间的反应，形成过酸。当涂覆在牙齿上时，所述过酸对漂白牙齿是十分有效的，使得可在较短的时间内并以较低的过氧化物水平实现有效的漂白作用。

在一个具体实施方案中，一个室含有包含具有过水解活性的蛋白质(即家族7碳水化合物酯酶)的低粘度水溶液，另一个室含有均为粉末形式的胶凝剂、过氧化物和羧酸酯化合物，使得当屏障破碎且允许各室内容物混合时，过氧化物和羧酸酯可发生由过水解酶催化的反应，在由液体和胶凝剂形成的可挤出凝胶中形成过酸，然后可例如使用托盘或条，将所述可挤出凝胶挤出并涂覆在牙齿上持续足够的时间(例如10-30分钟)，以漂白牙齿。

本发明实用性的更多方面从下文提供的详细描述来看将是显然的。应了解，详细描述和具体实施例虽然表明本发明的优选实施方案，但是仅仅旨在说明目的，并无意限制本发明的范围。

生物序列简述

下列序列遵循37 C.F.R. §§ 1.821-1.825 (“Requirements for Patent Applications Containing Nucleotide Sequences and/or Amino Acid Sequence Disclosures - the Sequence Rules (含核苷酸序列和/或氨基酸序列公开内容的专利申请规定—序列法则)”)，并且与世界知识产权组织(World Intellectual Property Organization，WIPO)标准ST.25 (2009)、欧洲专利公约(European Patent Convention，EPC)的序列表规定、专利合作条约(Patent Cooperation Treaty，PCT)规则5.2和49.5(a-bis)以及行政指令(Administrative Instructions)的第208节和附件C一致。核苷酸和氨基酸序列数据所用符号和格式遵循37 C.F.R. § 1.822中提供的法则。

SEQ ID NO: 1是海栖热袍菌(Thermotoga maritima) C277S变异过水解酶的氨基酸序列。