[发明专利]结合肽聚糖识别蛋白1的抗体

说明书

发明领域

本发明涉及免疫学领域。更具体地，本发明涉及用于鉴定能够刺激髓样细胞上表达的触发受体（TREM-1）的配体的方法，以及结合TREM-1的配体的抗体。这些抗体能够调节髓样细胞活化和因此调节免疫应答。

背景

肽聚糖识别蛋白1（另外称为PGLYRP1、PGRP-S、TNFSF3L、PGRP、TAG7和PGRPS）在嗜中性粒细胞中表达并在它们活化后释放。PGLYRP1在患病组织中高度丰富，并且已显示在通过先天免疫系统的细菌感染的清除中起重要作用。PGLYRP蛋白家族（PGLYRP1、PGLYRP2、PGLYRP3、PGLYRP4）均与细菌肽聚糖（PGN）相互作用，但在蛋白的PGN结合位点中有重要区别。PGLYRP1具有附加的沟，假定其构成未知效应物或信号传导蛋白的结合位点（J. Mol. Biol. 347:683-691 (2005)）。PGLYRP1是高度保守的、196个氨基酸长度的蛋白，由信号肽和肽聚糖结合域组成。

为了理解并由此操纵此蛋白在各种感染性和炎性疾病中的功能，鉴定由PGLYRP1介导的信号传导机制是重要的。

TREM-1在免疫调节中同样地具有充分描述的效果，但是迄今为止，尚未了解导致TREM-1介导的免疫功能的机制。TREM-1是在髓样细胞，如单核细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞上表达的受体。其是由234个氨基酸组成的跨膜蛋白，包括单个细胞外免疫球蛋白结构域和短的胞质尾。TREM-1不具有明显的信号传导基序，但是，当被活化时，形成二聚体/多聚体，并通过与含ITAM的信号接头蛋白DAP12相关联介导信号传导。下游信号传导可包括Syk和Zap70的磷酸化。下游信号传导可包括NFAT、ELK、NK-κB转录因子的活化。当TREM-1被活化时，其触发促炎性细胞因子，如TNF -α（TNF-α）、IL-8和单核细胞趋化蛋白-1从髓样细胞中的释放。

TREM-1在患有败血症、类风湿关节炎（RA）和炎性肠病（IBD）的患者中上调，并且越来越多的证据支持该理论认为TREM-1有助于炎性疾病的发生和进展。TREM-1信号传导的阻断已进一步在RA和IBD的体内小鼠模型中显示具有治疗活性。

TREM-1活化的作用方式仍然很难以捉摸，因为活化TREM-1的配体不是本领域中已知的。因此，在本领域中，存在对鉴定TREM-1的配体的手段的需求。在本领域中对于鉴定能够降低、阻断、或者干扰TREM-1与其配体的相互作用分子（如抗体）的方法存在需求。在本领域中对于能够结合TREM-1的配体，并从而降低、阻断，或干扰TREM-1被其配体的刺激的分子，如抗体存在需求。在本领域中对于能够结合TREM-1的配体的分子，如抗体存在需求。在本领域中对于能够结合TREM-1的配体并从而阻断TREM-1的活化和信号传导的分子，如抗体存在需求。在本领域中对于能够结合TREM-1的配体，并从而降低或阻断从表达TREM-1的髓样细胞的细胞因子释放的分子，如抗体存在需求。

本文所公开的是用于鉴定TREM-1的配体以及能够结合TREM-1的配体的分子如抗体的方法和测定法。本文描述的是，能够影响TREM-1活化的抗体。因此，本文所公开的抗体适于用作药物。结合TREM-1的配体，并且降低或阻断TREM-1与其配体相互作用的抗体对于患有慢性炎性疾病如类风湿性关节炎、银屑病关节炎和炎症性肠疾病的个体的生活质量可以具有实质性的影响。

概述

本发明涉及用于鉴定TREM-1的配体和结合TREM-1的配体的分子如抗体（本文中鉴定为PGLYRP1）的方法。本发明还涉及可通过本发明的方法鉴定PGLYRP1抗体。因此，本发明涉及PGLYRP1抗体，其能够通过PGLYRP1修饰TREM-1的活化，诸如能够通过PGLYRP1降低TREM-1活性（信号传导和/或活化）的PGLYRP1抗体。降低TREM-1的活性的抗体可用于炎症治疗。

用于鉴定TREM-1的配体的方法，其包括：（a）培养表达TREM-1、TREM-1的信号传导蛋白和报道基因构建体的细胞，所述报道基因构建体被所述信号蛋白活化；（b）当它与细胞、化合物或流体，例如生物流体或组织接触时（其触发TREM-1的活化），对所述表达TREM-1的细胞的活性进行检测，优选定量；（c）使（b）的培养物与TREM-1活化组分接触；（d）分离结合TREM-1的组分以及（e）表征所分离的组分。TREM-1的配体，通过本发明鉴定为PGLYRP1，可用于修饰TREM-1的活性。