[发明专利]用于调节β-连环蛋白表达的化合物及其应用

说明书

相关申请案的交互参照

本申请要求申请日为2011年11月11日的美国临时申请No.61/558,870的优先权；所述美国临时申请No.61/558 870与申请日为2011年9月14日的美国申请No.13/232,123相关；所述美国申请No.13/232,123是申请日为2010年9月2日的美国专利申请No.12/874,668(现为美国专利8039446)的分案申请；所述美国专利申请No.12/874,668是申请日为2009年1月21日的美国专利申请No.12/356 923(现为美国专利7915401)的分案申请；所述美国专利申请No.12/356 923是申请日为2008年4月30日的美国专利申请No.12/113,031(现已放弃)的后续申请；所述美国专利申请No.12/113,031要求了申请日为2008年1月24日的美国临时申请No.61/023,244和申请日为2007年5月1日的美国临时申请No.60/915,371的优先权。所述各申请案以其全部公开内容引入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及用于靶向细胞中β-连环蛋白mRNA的寡聚化合物(寡聚物,oligomer)，目的是降低β-连环蛋白的表达。降低β-连环蛋白的表达，有利于一系列医学病症的改善，如过度增生性疾病，包括癌症。本发明提供了包含寡聚物的治疗性药物组合物，以及用所述寡聚物调节β-连环蛋白表达的方法，包括治疗方法。

背景技术

β-连环蛋白(beta-catenin，也称为钙粘素相关蛋白和β-联蛋白)是细胞质蛋白中连环蛋白家族的成员，在由Wnt蛋白启动的信号通路中是关键物质，在多个发育过程中起到介导作用。受到生长因子影响时，β-连环蛋白会发生磷酰化反应，从而降低细胞黏附。

业已证明，在癌症的发展中,β-连环蛋白所起的作用,受APC(腺瘤性结肠息肉病)基因表达产物的调节，APC肿瘤抑制蛋白与β-连环蛋白结合，而β-连环蛋白与Tcf和Lef转录因子相互作用。Morin等(Morin等，Science，1997，275，1787-1790)报导，在β-连环蛋白和Tcf-4的介导作用下，APC蛋白会降低结肠癌的转录活化，其结果表明，β-连环蛋白的调节对APC肿瘤抑制效果起关键作用，而通过APC或β-连环蛋白的突变可规避这种调节。

Morin等的研究结果表明，β-连环蛋白突变影响了磷酰化的位置，从而使得细胞对由APC介导的β-连环蛋白向下调节作用不敏感，该机理是结肠肿瘤发生的关键(Morin等，Science，1997，275，1787-1790)。

一些研究对多种肿瘤细胞系中β-连环蛋白的突变进行了检测，在黑色素瘤细胞系中发现了极大数量的β-连环蛋白。

Bennett等的美国专利6066500给出了多种反义化合物/组合物，以及调节β-连环蛋白表达的方法。

考虑到β-连环蛋白在癌症发展中所起的作用，需要研发能够有效抑制β-连环蛋白功能的试剂。

发明内容

本发明提供一种具有10-50个连续相邻单体的寡聚物，其序列至少有80％与编码哺乳动物β-连环蛋白的核酸靶区段的序列反向互补。

本发明提供一种具有10-50个连续相邻单体的寡聚物，包括第一区段，所述第一区段的序列至少有80％与SEQ ID NO：173靶区段的反向互补序列相同，或至少有80％与选自于SEQ ID NOs：1-132、SEQ ID NOs：174-192、SEQ ID NO：193中的任一靶区段的序列相同。

本发明进一步提供一种具有所述寡聚物配体的结合物，其中，所述寡聚物通过共价键连接到一个或多个其本身不是核酸或单体的配体(结合物配体)。在一些方案中，所述结合物配体中含有一个固醇基团如胆固醇，或其它易于进入细胞的配体，或由它们组成。

本发明提供了一种具有所述寡聚物配体的结合物，其中，所述寡聚物通过共价键连接到一个具有带正电荷配体的聚合物，如聚乙烯醇(PEG)，即可选地，将寡聚物进行聚乙烯醇化。

本发明提供了多种药物组合物，包含本发明中所述寡聚物或所述结合物，以及药学上可接受的稀释剂，载体，盐或佐剂。