[发明专利]抗肿瘤坏死因子-α试剂及其用途

权利要求书

1.一种多肽，其包括与TNF-α结合的抗体单一结构域或其抗原结合片段，所述结构域包括轻链可变结构域(VL)，

其中所述的可变结构域包括选自SEQ ID NO:1-18中的至少一个氨基酸序列，或者其TNF-α结合片段或衍生物。

2.根据权利要求1所述的多肽，其中所述的可变结构域包括SEQ ID NO:1(VL18)或SEQ ID NO:2(VL11)。

3.根据权利要求1或2所述的多肽，其中所述的可变结构域拮抗人类TNF-α与TNF-α受体的结合。

4.根据权利要求3所述的多肽，其中所述的可变结构域进一步与至少一种其他的哺乳动物TNF-α发生交叉反应，其中所述的哺乳动物不是灵长目动物。

5.根据权利要求4所述的多肽，其中所述的哺乳动物为大鼠或小鼠。

6.根据权利要求4所述的多肽，其中所述的可变结构域与至少两种其他哺乳动物的TNF-α发生交叉反应，所述的至少两种其他的哺乳动物为啮齿动物物种或非啮齿动物物种。

7.根据上述权利要求的任意一项所述的多肽，其中所述的可变结构域通过删除所述的可变结构域的至少一个T_H表位而脱免疫。

8.根据权利要求7所述的多肽，其中所述的可变结构域包括对应于SEQ ID NO:1(VL18)的序列，其通过选自T7Q、V15P、(A51V-L54R/A51V-L54E)、K63S、E79K、(C80S)、T91A和L111K的至少一个氨基酸取代而脱免疫，所述的取代是指在SEQ ID NO:1中的氨基酸位置。

9.根据权利要求7所述的多肽，其中所述的可变结构域包括对应于SEQ ID NO:2(VL11)的序列，其通过选自T7Q、V15P、R31S、(A51V-L54R/A51V-L54E)、K63S、E79K、(C80S)、T91A、A100S和E106K的至少一个氨基酸取代而脱免疫，所述的取代是指在SEQ ID NO:2中的氨基酸位置。

10.根据权利要求7所述的多肽，其中所述的可变结构域包括至少一个序列，该序列选自SEQ ID NO:19-23(5个VL18变体)、SEQ ID NO:24-28(5个VL11变体)、以及其TNF-α结合片段或衍生物。

11.根据上述权利要求的任意一项所述的多肽，其进一步包括与其连接的白蛋白结合结构域。

12.根据权利要求11所述的多肽，其中所述的白蛋白结合结构域与所述的多肽连接形成融合物。

13.根据权利要求12所述的多肽，其中所述的白蛋白结合结构域与所述的多肽通过连接体连接形成融合物。

14.根据权利要求13所述的多肽，其中所述的连接体为肽连接体，其包括对应于SEQ ID NO:29(3L)的氨基酸序列。

15.根据权利要求11-14的任意一项所述的多肽，其中所述的白蛋白结合结构域将所述的多肽的半衰期增加5倍。

16.根据权利要求11-15任意一项所述的多肽，其中所述的白蛋白结合结构域对应于从兽疫链球菌Z5分离得到的白蛋白结合结构域。

17.根据权利要求16所述的多肽，其中所述的白蛋白结合结构域包括对应于SEQ ID NO:30(PEP)的序列、或者其白蛋白结合片段或衍生物。

18.根据权利要求11-17的任意一项所述的多肽，其中所述的多肽通过删除在所述的可变结构域和/或在所述的白蛋白结合结构域中的至少一个T_H表位而脱免疫。

19.根据权利要求17所述的多肽，其中所述的白蛋白结合结构域通过选自E12D、T29H-K35D和A45D的至少一个氨基酸取代而脱免疫，所述的取代是指在SEQ ID NO:30中的氨基酸位置。

20.根据权利要求17所述的多肽，其中所述的白蛋白结合结构域包括对应于SEQ ID NO:31的氨基酸序列。