[发明专利]伯醇的氧化和胺化

权利要求书

1.包括下述步骤的方法：

a)提供下式的伯醇

HO-(CH2)x-R1,

其中R1选自–OH、-SH、-NH2和–COOR2，x是至少3且R2选自H、烷基和芳基，

b)通过与NAD(P)+依赖性的醇脱氢酶接触氧化所述伯醇，和

c)使步骤a)的氧化产物与转氨酶接触，

其中所述NAD(P)+依赖性的醇脱氢酶和/或所述转氨酶是重组的或分离的酶，

其中所述NAD(P)+依赖性的醇脱氢酶是得自嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)的NAD(P)+依赖性的醇脱氢酶(数据库代码P42328)。

2.根据权利要求1的方法，其中步骤a)通过下式的链烷的羟基化

H-(CH2)x-R1

通过单加氧酶进行，所述单加氧酶是重组的或分离的单加氧酶。

3.根据权利要求1的方法，其中所述NAD(P)+依赖性的醇脱氢酶是具有至少一个锌原子作为辅因子的NAD(P)+依赖性的醇脱氢酶。

4.根据权利要求2-3之一的方法，其中所述单加氧酶选自恶臭假单胞菌的AlkBGT，得自热带假丝酵母或得自鹰嘴豆的细胞色素P450。

5.根据权利要求1-3之一的方法，其中所述转氨酶选自这样的转氨酶及其变体，其特征在于，在与青紫色素杆菌ATCC 12472的转氨酶(数据库代码NP_901695)的Val224对应的氨基酸序列的位置处，其具有选自异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸和亮氨酸的氨基酸，且在与青紫色素杆菌ATCC 12472的转氨酶(数据库代码NP_901695)的Gly230对应的氨基酸序列的位置处，其具有除了苏氨酸以外的氨基酸，且选自丝氨酸、半胱氨酸、甘氨酸和丙氨酸的氨基酸。

6.根据权利要求1-3之一的方法，其中在分离的或重组的丙氨酸脱氢酶和无机氮源存在下进行步骤b)和/或步骤c)。

7.根据权利要求1-3之一的方法，其中由NAD(P)+依赖性的醇脱氢酶、转氨酶、单加氧酶和丙氨酸脱氢酶组成的组中的至少一种酶是重组的，且以具有相应酶的全细胞催化剂的形式提供。

8.根据权利要求7的方法，其中所有酶以一种或多种全细胞催化剂的形式提供，且一种全细胞催化剂具有所有必要的酶。

9.根据权利要求1-3之一的方法，其中在步骤b)中，或者在步骤b)和c)中，存在有机共溶剂，其具有大于-1.38的logP。

10.根据权利要求9的方法，其中所述共溶剂选自不饱和脂肪酸。

11.根据权利要求9的方法，其中所述共溶剂是式R3-O-(CH2)x-O-R4的化合物，其中R3和R4各自且彼此独立地选自甲基、乙基、丙基和丁基，且x是1-4。