[发明专利]新型植物终止子序列

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求提交于2011年7月15日的印度临时申请2001／DEL／2011和提交于2011年9月11日的美国临时申请61／557,433的权益，每一个的全文以引用方式并入本文。

技术领域

本发明涉及植物分子生物学和植物基因工程的领域。更具体地，其涉及用于调节植物基因表达的新型植物终止子序列。

背景技术

植物基因工程近来的进步已打开了工程化植物以具有改善的特性或性状的新的大门。这些转基因植物在其基因组中典型地具有重组DNA构建体，其具有可操作地连接至多个调控区的蛋白编码区，所述调控区使转基因准确的表达。转基因植物中几个帮助调控基因表达的调控元件的例子为启动子、内含子、终止子、增强子和沉默子。

植物基因工程已发展至将多种性状引入商业上重要的植物中，也称为基因堆积。这可通过多基因转化来实现，其中转入多个基因以生成可表达复合表型或多个表型的转基因植物。然而调节或控制每种转基因的表达最优化是重要的。调控元件需要是各种不同的，以避免导入相同的转基因植物重复序列，相同的重复序列与对转基因的表达和稳定性的不可取的负面影响相关联(Peremarti等人(2010)Plant Mol Biol73：363-378；Mette等人(1999)EMBO J18：241-248；Mette等人(2000)EMBO J19：5194-5201；Mourrain等人(2007)Planta225：365-379、美国专利7632982、美国专利7491813、美国专利7674950、PCT申请PCT／US2009／046968)。因此，发现和表征能用于在重要作物物类中表达异源核酸的新型调控元件是重要的。各种不同的调控区能够被用于控制每种转基因的表达最优化。

调控序列位于包含转录终止和3′mRNA加工所需信号的蛋白编码区的下游，被称为终止子序列。所述终止子序列在mRNA加工、定位、稳定性和翻译中起关键作用(Proudfoot，N，(2004)Curr Opin Cell Biol16：272-278；Gilmartin，G.M.(2005)Genes Dev.19：2517-2521)。包含在终止子序列中的所述3’调控序列可影响基因的表达水平。已经发现植物细胞中嵌合基因的优化表达依赖于适当的3′序列的存在(Ingelbrecht等人(1989)Plant Cell1：671-680)。对基因的渗漏终止子的通读转录可导致从另一个基因的启动子的一个转基因的无益转录。此外，在具有趋同基因的渗漏转录终止的转基因植物中，转基因的双向、趋同转录可导致趋同基因的重叠转录。趋同、重叠转录可降低转基因表达、或生成反义RNA(Bieri，S.等人(2002)Molecular Breeding10：107-117)。这强调了发现新型和高效转录终止子的重要性。

发明内容

本发明描述了调节植物中基因表达的调控序列。具体地，描述的调控序列为转录终止子序列。本发明提供了包含终止子序列的重组DNA构建体。

一个实施例为包含分离的多核苷酸的重组构建体，所述分离的多核苷酸包含(a)如SEQ ID NO：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、129-161或162所示的核苷酸序列；或(b)与如SEQ ID NO：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、129-161或162所示的序列具有至少95％的序列同一性的核苷酸序列；或(c)(a)或(b)的功能性片段；其中所述分离的多核苷酸在植物细胞中作为转录终止子起作用。在另一个实施例中，所述分离的多核苷酸可操作地连接至异源多核苷酸的3’端，所述异源多核苷酸可操作地连接至启动子。