[发明专利]植物细胞分化促进剂

说明书

技术领域

本发明涉及植物细胞分化促进剂，其包含碳原子数为4～24的酮醇脂肪酸，所述碳原子数为4～24的酮醇脂肪酸(以下称为特定的酮醇脂肪酸)中，构成羰基的碳原子与结合有羟基的碳原子处于α位的位置。本发明进一步涉及由愈伤组织或植物切片制成再生植物体的制成方法，其包含添加特定的酮醇脂肪酸的步骤。

背景技术

利用了植物体所具有的分化全能性的组织培养技术在以均质的优良克隆的增产、脱毒植物的再生、新品种制成为目的的育种中已经变得不可或缺。通过使用植物体的组织培养技术，使愈伤组织增殖，接着对增殖组织改变培养基中的生长素(auxin)和细胞因子的浓度比，从而可以使其向不定芽或不定根进行器官分化，或经由不定胚而得到再生植物体。然而，已知这些组织培养技术受到所用的基本培养基和/或碳源、植物激素、盐类的种类、浓度或者培养温度等的影响，稳定地由愈伤组织诱导不定胚、不定芽、和/或不定根经常是困难。

通过应用组织培养技术，可以进行向高等植物导入外来基因的转化和/或细胞融合。例如，农杆菌转化法中，进行以下过程：使植物片或愈伤组织感染农杆菌后，移至包含筛选用抗生素的再分化培养基进行培养，在筛选导入了外来基因的细胞的同时使其再分化。此时，根据植物种类不同，有时虽然植物细胞内导入了外来基因，但由于再分化能力低而得不到转化体。另外，在利用远缘的组合的细胞融合杂种的制成中，还存在即使得到了融合细胞，也由于再分化能力低而在中途阶段一方的染色体脱落，不能再分化成完全的植物体这样的问题。因此，转化和/或细胞融合的技术中，由愈伤组织向植物体的再分化效率是重要的。

到目前为止，为了高效且短时间地使其再分化，提出了数个方案。例如，日本特开平5-219851号公报中报告了将用添加了马铃薯提取物的愈伤组织增殖培养基培养而得的不定胚样的愈伤组织移植到降低了主要无机盐类浓度的再分化培养基中的禾本科植物的再生方法；日本特开平6-153730号公报中报告了使增殖了的愈伤组织某种程度干燥然后移植到再分化培养基，进行静置培养的灯芯草的愈伤组织再分化法；日本特开2000-217457号公报中报告了置床于含有细胞分裂素系的植物激素的进行了pH值调整的合成培养基进行培养的洋麻的愈伤组织再分化方法；日本特开2000-270854号公报中报告了将补血草的植物体的一部分用含有毒莠定的培养基进行培养，诱导愈伤组织，进行培养增殖，然后将其愈伤组织用含有细胞分裂素的培养基进行培养的制作再分化植物体的方法。进而，日本特开平5-49470号公报、日本特开平10-191966号公报、及日本特开平10-229875号公报中公开了培养属于肠杆菌属、芽孢杆菌属或者绿脓杆菌属的微生物，从该培养液提取的植物愈伤组织细胞分化剂。

然而，这些方法均限定了品种和/或生理的要素，并且其效果难以说是充分的。

另一方面，本申请发明者们发现，作为碳原子数为4～24的酮醇脂肪酸的、构成羰基的碳原子与结合有羟基的碳原子处于α位的位置的、碳原子数为4～24的酮醇脂肪酸，特别是9-羟基-10-氧代-12(Z),15(Z)-十八碳二烯酸具有花芽形成促进作用、进而具有植物赋活作用(日本特开平11-29410号公报及日本特开2001-131006号公报)。

发明内容

发明要解决的课题

本发明的课题是提供植物细胞分化促进剂，该植物细胞分化促进剂促进由愈伤组织向正常的不定胚、不定根、或不定芽的分化，或促进由植物切片向不定根或不定芽的分化，作为结果可以稳定地获得再生植物体。另外，本发明的课题是提供促进由从植物体的一部分诱导而得的愈伤组织向不定胚、不定根、或不定芽的分化，或由植物切片向不定根或不定芽的分化，高效地获得再生植物体的方法。

用于解决课题的方法

对于作为植物激素的一种的特定的酮醇脂肪酸，本发明者对于其效果进行了深入研究，结果令人惊讶地发现，在由愈伤组织向不定胚的诱导工序中，特定的酮醇脂肪酸促进由愈伤组织向正常的不定胚的诱导，从而完成了本发明。

本发明还涉及以含有该特定的酮醇脂肪酸、或其衍生物作为有效成分为特征的植物细胞分化促进剂，以及通过使用该特定的酮醇脂肪酸或其衍生物的再生植物体的制成方法。

更具体地，本申请包含以下发明。

[1]植物细胞分化促进剂，其包含碳原子数为4～24的酮醇脂肪酸，所述碳原子数为4～24的酮醇脂肪酸中，构成羰基的碳原子与结合有羟基的碳原子处于α位的位置。