[发明专利]灭活登革热病毒疫苗

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年5月26日提交的美国临时申请61/490,205和2011年12月15日提交的61/570,966的较早申请日的权利，所述申请的公开内容并入本文。

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背景

登革热是通过蚊子传播的人类急性病毒性疾病。其为全球热带和亚热带的地方性疾病，每年估计有100,000,000例发生。虽然比较罕见，但是登革出血热(DHF)和登革休克综合征(DSS)在儿童中是主要的致死原因。目前，还没有保护免于登革热的疫苗，而通过控制蚊子媒介来防病的试图也被证明基本无效。因此，仍然需要安全和有效的疫苗来保护免于由登革热病毒导致的疾病。

简述

本发明公开内容涉及配制引发针对登革热病毒的免疫应答的组合物。

附图简述

图1是泊洛沙姆表面活性剂α-羟基-ω-羟基聚(氧乙烯)聚(氧丙烯)聚(氧乙烯)三嵌段共聚物的通式的图示说明。

图2A和B是说明包含纯化的灭活登革热病毒的免疫原性组合物的纯化和灭活的示例性过程的流程图。图2C和D是说明纯化和灭活的可替代过程的流程图。

图3A和B是说明包含纯化的灭活登革热病毒的免疫原性组合物的配制的示例性过程的流程图。

图4A-B是说明配制包含纯化的灭活登革热病毒的免疫原性组合物之后产物表征的代表性结果的表。

图5A-C是说明冻干和重构之后产物表征的代表性结果的表。

图6A和B是稳定性特征的图示代表(A：固有荧光280/320；B：ELISA)。

详述

介绍

本公开内容涉及配制免疫原性组合物。具体而言，本公开内容涉及配制组合物，诸如原料疫苗制品(bulk vaccine preparation)和免疫原性组合物，其含有一株或多株纯化的灭活登革热病毒。本文公开的配制方法增加了含有纯化的灭活登革热病毒的免疫原性组合物的回收率和稳定性，促进它们的产生、储存和分配。

本公开内容的第一个方面涉及组合物，其包含一种或多种纯化的灭活登革热病毒与缓冲剂和表面活性剂的组合。有利地，此类组合物是适合于配制成免疫原性组合物(例如，防止由于登革热病毒的感染和/或疾病的疫苗)的灭活登革热病毒的原料制品(bulk preparation)。例如，与不包含表面活性剂的制剂相比，添加选择的表面活性剂增强了抗原性保存的灭活登革热病毒的回收率。含有表面活性剂的纯化的灭活登革热病毒的制剂具有减少(例如，在冻干、储存和重构过程中)灭活病毒的非特异性吸附和/或聚集的有利特性。

本文公开的组合物可以包含一种或多于一种血清型的登革热病毒。通常，该组合物包括来自多于一种血清型的多种登革热病毒，即登革热血清型1、登革热血清型2、登革热血清型3和/或登革热血清型4(分别为DEN-1、DEN-2、DEN-3、和/或DEN-4)。例如，组合物可以包含来自不同血清型的登革热病毒中的两种、三种或四种不同的病毒。在一个具体实例中，该组合物包括四种不同的纯化的灭活登革热病毒，每种不同的血清型能够引发对于每种不同血清型的登革热病毒特异性的免疫应答。因此，该组合物有利地包含四种不同的纯化的灭活登革热病毒，其引起针对所有DEN-1、DEN-2、DEN-3 和DEN-4的免疫应答。一种或多种病毒可以选自野生型病毒(即，从天然存在的分离株的强毒病毒繁殖或者对应于天然存在的分离株的强毒病毒)，或者一种或多种病毒可以选自减毒病毒。选择的病毒可以是重组病毒。例如，重组病毒可以是嵌合病毒，例如，具有来自登革热病毒的核酸和来自另一种黄病毒(诸如不同登革热病毒、黄热病病毒或日本脑炎病毒)的核酸的病毒。通常，嵌合病毒包括登革热M和登革热E蛋白中的一种或两种。单一组合物可以以任何组合包含一种或多种野生型病毒、一种或多种减毒病毒、一种或多种重组病毒、和/或一种或多种嵌合病毒。

可以单独或组合使用化学、物理和/或辐射灭活剂灭活纯化的灭活登革热病毒。可以通过暴露于甲醛、β-丙内酯(BPL)、过氧化氢、紫外线辐射和γ辐射或这些技术的任何组合灭活纯化的灭活登革热病毒。