[发明专利]生物制品的个人化产生和对体细胞进行重编程的方法

说明书

相关申请案的交叉引用

本申请案主张2011年1月3日申请的美国临时专利申请案第61/429,409号、2011年1月10日申请的美国临时专利申请案第61/431,376号的优先权。所有前述申请案均以全文引用的方式并入本文中。

背景技术

目前存在许多在治疗学上用于治疗许多疾病的重组多肽和蛋白质。这些重组多肽和蛋白质在商业上都是使用原代连续非人类或人类二倍体细胞系制造的。举例来说，一些是使用细菌（如大肠杆菌（E.Coli））制造的，而其它的是使用酵母或动物来源的多种卵巢细胞系制造的。细菌不能被使用来制造一些多肽和蛋白质，尤其在糖基化模式和其它蛋白质修饰对生物制品的生物受体结合亲和力、生物活性、生物分布或药物动力学或对接受者免疫识别至关重要时。当糖基化是关键可变因素时，中国仓鼠卵巢细胞是当前生物制造最常用的细胞系之一。

不幸的是，需要长时间使用重组多肽或蛋白质或用于长期治疗会使得患者产生针对所述产品的中和抗体，从而使得患者对所述药物的反应较小或没有反应。在一些情况下，患者可以改用同一类别的另一种药物，如多种抗-TNF生物制品，如恩博（Enbrel），也称为依那西普（Etanercept）；瑞米凯德（Remicaide），也称为英利昔单抗（Infliximab）；赛妥珠单抗（Certolizumab）；以及修美乐（Humira），也称为D2E7，它们常规地用于治疗如类风湿性关节炎、幼年型类风湿性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、强直性脊柱炎、溃疡性结肠炎以及克罗恩氏病（Crohn′s disease）的疾病。然而，产生针对一种特定抗-TNF生物制品的中和抗体通常使患者倾向于最终产生针对另一种抗-TNF生物产品的中和抗体。在一些情况下，对于患者不存在替代疗法，因此这种中和抗体形成会使得患者没有治疗可选择。即便是在存在适当的治疗选择时，产生针对同一类别的其它药物的中和抗体的倾向最终也意味着这些患者可能会没有治疗可选择。

可以被人类抗体中和的其它生物产品包括：那他珠单抗（Natalizumab）或泰萨布里（Tysabri），一种用于多发性硬化的创新疗法；和狄诺塞麦（Denosumab），一种针对核因子κ-B受体活化因子配体（RANKL）的完全人单克隆抗体，被批准用于治疗骨质疏松症和化学疗法诱发的骨裂，并且可能用于治疗由HRT和激素类避孕药引起的乳癌。阿巴西普（Abatecept）是一种被批准用于已变得用抗-TNF疗法难治愈的类风湿性关节炎患者的CTLA-4融合蛋白。尽管它的使用太新而没有关于阿巴西普诱导的中和抗体的证据，但也有可能的是它可以诱导人抗体中和抗体反应。

除基于抗体和融合蛋白的药物之外的其它多肽和蛋白质也已显示在长期治疗的情况下会引发免疫反应。举例来说，重组人类红细胞生成素引发中和抗体形成从而降低它的功效并且会引起罕见的发育不全综合症。另外，对于血友病患者来说针对凝血因子疗法的抗体的产生率在所述患者中高达25%-30%。这是使用凝血因子情况下的普遍问题。针对癌症和乙型肝炎的重组干扰素α2a疗法也因产生针对所述疗法的中和抗体而受阻。针对身高矮小的儿童的长期生长激素疗法的难治愈性也成问题。亦有关于针对一些胰岛素产品的中和抗体形成的报道。

有可能引发中和抗体的其它生物药物包括全血、血清、血浆混合液或生物供应品的其它主要来源，例如，人类白蛋白、人类α1-蛋白酶抑制剂、人类抗血友病因子/血管性血友病因子（von Willebrand Factor）复合物、贝比贝歌（BabyBig）静脉内肉毒中毒免疫球蛋白、C1酯酶抑制剂、纤维蛋白封闭剂（fibrin sealant）、纤维蛋白原、静脉内免疫球蛋白、皮下免疫球蛋白、蛋白质C浓缩物、ρ(D)静脉内免疫球蛋白、凝血酶、血管性血友病因子/凝血因子VIII复合物。

重组多肽和蛋白质引发基于多种特征的免疫反应和中和抗体产生，所述特征包括：生物治疗的时间范围、重复疗法的时间间隔、生物制品的氨基酸组成以及对生物制品的修饰，如糖基化、甲基化、亚硝基化、唾液酸化、磷酸化、硫酸化、异戊烯化、硒化、泛素化、维生素依赖性修饰、蛋白质结合缔合、酰化、糖化、三维构型以及超螺旋化。因此，需要在用生物产品处理的动物中产生具有降低的抗原性水平的多肽蛋白质产物的方法。

本文中所引用的所有参考文献的教示以全文引用的方式并入本文中。

发明内容