[发明专利]哺乳动物细胞中可溶性病毒融合糖蛋白的表达

权利要求书

1.一种分离的核酸，该核酸包括具有约51%或更大GC含量的、编码一种可溶性病毒融合蛋白的一个核苷酸序列，该融合蛋白包括与SEQ ID NO:7具有90%或更大一致性的一个氨基酸序列。

2.如权利要求1所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列编码包括与SEQ ID NO:7具有95%或更大一致性的氨基酸序列的一个蛋白。

3.如权利要求1所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列编码包括SEQ ID NO:7的氨基酸序列的一个蛋白。

4.如权利要求1至3中任一项所述的分离的核酸，其中该可溶性病毒融合蛋白缺乏一个功能膜相关区域。

5.如权利要求4所述的分离的核酸，其中该可溶性病毒融合蛋白缺乏对应SEQ ID NO:2的525至574位氨基酸的C端跨膜区域氨基酸。

6.如权利要求1至5中任一项所述的分离的核酸，其中该蛋白包括一个标签。

7.如权利要求1至5中任一项所述的分离的核酸，其中该蛋白不包括标签。

8.如权利要求1至7中任一项所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列的GC3含量是76%或更大。

9.如权利要求8所述的分离的核酸，包括核苷酸序列SEQ ID NO:6。

10.如权利要求1至9中任一项所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列的GC含量是约58%或更大。

11.如权利要求10所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列的GC3含量约100%。

12.如权利要求10或11所述的分离的核酸，包括核苷酸序列SEQ ID NO:5。

13.如权利要求1至12中任一项所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列与SEQ ID NO:3具有65%或更大的一致性。

14.如权利要求13所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列与SEQ ID NO:3具有73%或更大的一致性。

15.如权利要求14所述的分离的核酸，其中该核苷酸序列与SEQ ID NO:3具有77%或更大的一致性。

16.如权利要求1至15中任一项所述的分离的核酸，进一步包括与该核苷酸序列功能相关的一个顺式调节元件。

17.如权利要求16所述的分离的核酸，其中该顺式调节元件包括一个转录后加工元件。

18.如权利要求17所述的分离的核酸，其中该转录后调节元件来自土拨鼠肝炎病毒。

19.如权利要求1至18中任一项所述的分离的核酸，其位于一个表达载体中。

20.一种细胞，包括权利要求19所述的分离的核酸。

21.一种细胞，包括整合到细胞DNA内的权利要求1至15中任一项所述的核苷酸序列。

22.如权利要求20或21所述的细胞，细胞表达每毫升细胞至少2微克该蛋白。

23.如权利要求22所述的细胞，细胞表达每毫升细胞至少6微克该蛋白。

24.如权利要求23所述的细胞，细胞表达每毫升细胞至少200微克该蛋白。

25.如权利要求24所述的细胞，细胞表达每毫升细胞至少500微克该蛋白。

26.如权利要求25所述的细胞，细胞表达每毫升细胞至少1毫克该蛋白。

27.如权利要求26所述的细胞，细胞表达每毫升细胞至少1.3毫克该蛋白。

28.如权利要求27所述的细胞，细胞表达每毫升细胞至少1.6毫克该蛋白。

29.如权利要求20至28中任一项所述的细胞，其分泌该可溶性病毒融合蛋白。

30.如权利要求20至29中任一项所述的细胞，其是一种哺乳动物细胞。

31.如权利要求30所述的细胞，其中该细胞是一种非粘附细胞。

32.如权利要求30或31所述的细胞，其中该细胞是一种CHO细胞或CHO衍生的细胞。