[实用新型]一种纳米材料检测试纸条

说明书

技术领域

本实用新型涉及生物技术应用领域，具体地说是一种纳米材料检测试纸条。 

背景技术

NGAL（NeutrophiL GeLatinase Associated LipocaLin）的分子量22KD、也有报告25KD，主要存在于中性类细胞内，其他组织中存量很少。各种原因（创伤、中毒、感染、疾病）导致急性和慢性肾损伤时，肾脏组织NGAL量明显升高释放入血液。检测血和/或尿NGAL是判断和评估急性和慢性肾损伤的生物标志物，是肾实质结构损伤的指标。类似诊断急性心肌梗死损伤的金标准心肌肌钙蛋白I、T。目前临床诊断急性和慢性肾损伤（功能不全）主要是检测血肌酐（creatine），尿素氮、尿微量蛋白，均为肾损伤的间接功能指标。急性肾损伤后，2-3天血肌酐方出现。NGAL在急性肾损伤2-3小时后在血和尿中就明显升高，检测NGAL提前和极大提高了诊断肾实质损伤的能力的时间，对合理诊治，降低死亡率提供了客观依据。 

美国医院住院病人中急性肾损伤肾功能损伤患者约占总数5-7%，在医院重症病房（ICΜ）病人中比例高达25%，死亡率高达50-80%。急性和慢性肾损伤涉及心脏手术、化疗和放疗、重症高血压、糖尿病、败血症、心力衰竭、以及各种类型心肾综合征。该类病在美国麻省23家医院急性肾损伤（AKI）年花费保守估计80亿美元。因此，应用本申请专利检测NGAL将发挥巨大的社会和经济效益。 

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的不足，本发明要解决的技术问题是提供一种纳米材料检测试纸条，专门用于检测人尿液或血液中的NGAL,其具有操作简便、灵敏度高，检测0.01-0.1ng/mL较传统方法敏感性提高1000倍、结果稳定等优点。 

技术方案：为了克服现有技术中存在的不足，本实用新型提供一种纳米材料检测试纸条，包括设在固定板上依次相连的样品垫、纳米材料垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；在硝酸纤维素膜上设有检测线抗体涂层和质控线抗体涂层，在纳米材料垫上设有金标抗体涂层，所述金标抗体涂层为鼠抗人NGAL抗体涂层，检测线抗体涂层为NGAL单克隆抗体涂层，所述质控线抗体涂层为羊抗鼠IgG涂层。 

所述纳米材料垫为聚酯纤维膜制成的垫。

所述样品垫为玻璃纤维膜制成的垫。

所述金标抗体涂层是纳米金包银壳标记物相联的复合物的涂层。

  有益效果：本实用新型的使用多种尺寸中空的金纳米壳代替目前胶体金试纸条常用的球形纳米颗粒。应用于人血和/或尿NGAL检测，特异性高，在基于白色背景下能比球形金纳米颗粒产生更好的分辨光信号。而且由于中空金壳的重量轻于同样大小的实心纳米金颗粒，其免疫层析的速度加快，有利于试纸的快速检测。应用特定条件下纳米粒子与DNA和蛋白质共价键结合机制，生物素标记的单链DNA连接二种尺寸的纳米抗体，增强检测信号达1000倍。结果易观察，灵敏度达到10pg/mL，15分钟内就能判读结果，具有良好的稳定性和重复性。操作简便，无需特殊仪器设备，可应用于各种原因导致的急性肾损伤的早期诊断，慢性肾功能不全透析及治疗效果评判。尤其适宜在广大基层医院推广和应用。

附图说明

图1为本实用新型最佳实施例的整体结构示意图。 

1、样品垫  2、纳米材料垫：金标抗体涂层  3、硝酸纤维素膜  4、吸收垫   5、检测线抗体涂层   6、质控线抗体涂层 

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型作更进一步的说明。 

材料： 

检测线抗体为抗人NGAL单克隆抗体，质控线抗体为羊抗鼠IgG，金标抗体为鼠抗人NGAL抗体，购买于Genscript The Biology CRO南京公司。

其他材料均自市场上购买。 

实施例1 

（1）纳米金壳溶液的制备：

以柠檬酸钠和鞣酸为双稳定剂和还原剂，制备单分散的，尺寸可调的准球形银纳米颗粒溶液。在50-70℃的水浴下，将1.5-2.0ml的1%（AgNO₃溶液加入到50-70ml去离子水中，并加热至恒温。该溶液体系记为A；在50-70℃的水浴下，将0.05-5.0ml的0.5%的鞣酸溶液和1-3ml的1%的柠檬酸钠溶液加入到20-40ml的去离子水中，并加热到恒温，该溶液记为B。在剧烈搅拌下，将B导入A中，并持续搅拌到溶液呈现亮黄色，此后将反应溶液加热到沸腾，并保持回流，持续10-30分钟，室温冷却后定容到100ml。