[实用新型]一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白尿液检测卡

说明书

技术领域

本实用新型涉及免疫层析检测技术领域，具体涉及一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白尿液检测卡。

背景技术

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL），又称人脂质运载蛋白2（lipocalin 2，LCN2）或噬铁蛋白（siderocalin），是人脂质运载蛋白家族中的一个新成员。NGAL是Kjeldsen等在1993年研究中性粒细胞时发现的一种特殊颗粒组份，与明胶酶B即基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）密切相关。NGAL是一种小分子蛋白，其可表达于中性粒细胞和某些上皮细胞，如肾小管上皮细胞中。在多种原因引起的肾损伤中，NGAL可显著升高，释放于尿液和血液中。NGAL在损伤2小时内即可迅速升高，因而，NGAL可作为一种高灵敏度的急性肾损伤早期诊断标志物。

在正常生理情况下，NGAL含量较低，能刺激肾祖细胞向肾小管上皮细胞分化，以保障肾脏正常的生长发育。当肾缺血或毒素急性肾小管损伤时，在开始的两个小时内，受损的肾小管上皮细胞能高表达NGAL，从而诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡，以保护肾组织免受攻击；另一方面高水平的NGAL能促进肾小管上皮细胞再生修复，使肾脏功能得以恢复。

据丹麦Bioporto公司研究，健康志愿者EDTA血浆中NGAL浓度分布在37–106ng/mL，平均值为63ng/mL，尿液中浓度分布在0.7-9.8ng/mL，平均值为5.3ng/mL。而ICU病房中急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）患者NGAL浓度在血清中为66-922ng/mL，尿液中为110-40,000ng/mL。

2005年，丹麦BioPorto公司首先推出ELISA商品检测试剂盒，可用于血清（浆）、尿液中NGAL检测。此外，美国R＆D Systems公司也研发出ELSIA检测试剂盒，美国博适公司Triage分析仪也可对EDTA抗凝血浆或全血（双抗体夹心免疫荧光层析法）中的NGAL进行检测。目前已有适用于全自动免疫分析仪的分析系统面世，如美国雅培公司的Architecti2000SR/i1000SR全自动免疫分析仪可测定尿液NGAL（化学发光免疫法）。但其中的ELISA存在着操作繁琐，检测耗时长等缺点；全自动分析仪价格昂贵，不适合检测少量标本使用。相比之下，床旁检测（point care of testing，POCT）可方便快速地提供可靠检验结果，有助于临床医师更早制订治疗策略，并节省治疗费用。

POCT中的侧向流免疫层析检测法具有检测迅速、操作简便、准确和成本低等特点，适合用于检测NGAL。临床上，急性肾损伤患者在尿常规检查中，尿液外观多呈浑浊，尿色深，根据病情不同，尿蛋白定性可为阴性～++++；在尿沉渣检查中，可发现肾小管上皮细胞、上皮细胞管型、颗粒管型、红细胞、白细胞和晶体存在。因此，在对急性肾损伤疑似患者进行尿液检测时，往往需要将尿液离心后再进行分析物检测。如不对尿液处理直接进行检测，则尿液中的大分子物质一方面可能会造成检测卡上膜或垫的堵塞，另一方面可能部分会连同NGAL一起展层至检测区，使得检测区背景颜色较深而干扰结果判断。尿液离心这一步骤视情况不同常需要3-5分钟或更长时间，且较繁琐，不利于实现NGAL尿液检测卡对NGAL的快速检测。

发明内容

本实用新型针对现有技术的不足，提供一种基于侧向流免疫层析法，操作简单，尿液无需离心即可直接检测的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白尿液检测卡，其具有快速、抗干扰能力强、准确等特点。

本实用新型通过以下技术方案实现：一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白尿液检测卡，由上卡壳、试纸条和下卡壳组成，所述上卡壳上设置有加样孔和检测窗，所述试纸条由在支撑物上依次相互搭接的样品区、结合区、检测区、吸水区组成，所述下卡壳中间为放置试纸条的卡槽，其特征在于：所述加样孔底部固定有尿液过滤装置。

所述尿液过滤装置与样品区不接触，由孔径从上到下逐渐减小的不对称多孔材料制成。一种优选的技术方案，其特征在于所述尿液过滤装置由聚酯膜或聚砜膜构成，优选聚砜膜。

所述上下卡壳材料可由不吸水的塑料制成，包括人工合成或自然界有机材料，如聚苯乙烯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚酯或纤维素及其衍生物等。

所述支撑物可由PVC板或PS板构成。

所述样品区可由选自纤维素膜、玻璃纤维膜或无纺布中的一种或多种材料构成。