[实用新型]氟甲喹检测试剂盒

说明书

（一）技术领域：本实用新型涉及一种氟甲喹检测试剂盒，特别是检测动物源性食品中氟甲喹残留量的试剂盒。 

（二）背景技术：氟甲喹属于喹诺酮类抗菌药，能抑制细菌DNA螺旋酶，抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强，已成为兽医临诊和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，被大量用于治疗、预防和促生长。由于其耐药性和潜在的致癌性，欧盟、日本及我国均制定了其组织中的最高残留限量。 

目前，常用于氟甲喹残留检测的方法主要有荧光分光光度法和仪器分析法。荧光分光光度法需要专业的技术人员来操作，不适宜推广使用。仪器分析法主要有高效液相色谱分析法（HPLC）、液质串联质谱法(LC-MS/MS)等，这些方法的前处理过程繁琐、检测费用较高，不宜用于大量样本筛查。推广使用均受到限制。 

（三）实用新型内容：本实用新型提供一种小巧轻便的氟甲喹检测试剂盒，其操作简便，检测灵敏度高，成本低，可进行一次连续进行多个样品中氟甲喹残留量的测定，减少了检测样本所需要的时间。 

氟甲喹检测试剂盒，包括固相载体、放试剂瓶的下凹瓶位、位于下凹瓶位上的试剂瓶，固相载体上设有微孔条，微孔条包括微孔、包被层；试剂瓶包括装有氟甲喹单克隆抗体溶液的试剂瓶、装有辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体的试剂瓶。 

所述包被层由氟甲喹偶联抗原组成。 

所述试剂盒还包括6瓶装有氟甲喹标准液的试剂瓶，2瓶装有底物显色液的试剂瓶，1瓶装有终止液的试剂瓶，1瓶装有洗涤液的试剂瓶，1瓶装有缓冲液的试剂瓶。 

所述固相载体由96孔聚苯乙烯试剂板组成。 

每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定，既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。检测时，样本中的氟甲喹将和微孔条包被层的氟甲喹偶联抗原竞争氟甲喹单克隆抗体，加入辣根过氧化物酶标记的羊抗 鼠抗抗体后，用底物显色液显色，样本吸光度值与样本中氟甲喹的残留量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氟甲喹残留量。 

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：检测灵敏度为：0.3μg/L。相对于其他氟甲喹检测方法，本试剂盒所需仪器较少，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。 

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于动物源性食品中氟甲喹残留量的检测。 

（四）附图说明：

图1本实用新型试剂盒的固相载体一列微孔条图。 

图2 本实用新型固相载体图。 

图3 本实用新型盒体、下凹瓶位结构示意图； 

（五）具体实施方式：

如图1至图3所示，氟甲喹检测试剂盒，盒体1内具有固定模具形成的下凹瓶位2，下凹瓶位用于放置装有溶液的试剂瓶，96孔聚苯乙烯试剂板组成的固相载体3，固相载体的的微孔条4包括微孔5和包被层6，包被层由氟甲喹偶联抗原组成，试剂瓶包括装有氟甲喹单克隆抗体溶液的试剂瓶、装有辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体的试剂瓶。 

为了更有利于检测氟甲喹残留的检测，试剂盒还可以包括有6瓶装有氟甲喹标准液的试剂瓶，2瓶装有底物显色液的试剂瓶，1瓶装有终止液的试剂瓶，1瓶装有洗涤液的试剂瓶，1瓶装有缓冲液的试剂瓶。 

试剂盒的试剂瓶内的具体成分如下： 

（1）氟甲喹单克隆抗体工作液7ml /瓶； 

（2）氟甲喹标准品溶液1ml/瓶，浓度分别为0μg/L、0.3μg/L、1.2μg/L、4.8μg/L、19.2μg/L、76.8μg/L； 

（3）辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体工作液12ml/瓶； 

（4）底物显色液，分别为底物显色A液，底物显色B液，底物显色液A液为过氧化脲7ml/瓶，底物显色液B液为四甲基联苯胺7ml/瓶； 

（5）终止液7ml/瓶； 

（6）缓冲液50ml/瓶，为含有2%卵清蛋白、pH值为7.1、0.2-0.5mol/L磷酸盐缓冲液。使用时2倍稀释。 

（7）洗涤液40ml/瓶，为含有0.8%-1.2%吐温-80、0.5%硫柳汞防腐剂、0.2mol/L磷酸盐缓冲液。使用时20倍稀释。 

试剂盒中用到的主要材料的制备方法： 

氟甲喹偶联抗原的制备 

（1）氟甲喹半抗原的制备 

氟甲喹与6-氨基己酸通过酰化方法得到。 

（2）氟甲喹偶联抗原的制备 

将氟甲喹半抗原与卵清蛋白通过碳化二亚胺法偶联得到氟甲喹偶联抗原。 

氟甲喹单克隆抗体的制备 

（1）动物免疫