[实用新型]一种毒物激活能力指标评估试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型提供了一种毒物激活能力指标评估试剂盒，属于分子生物学技术领域。

背景技术

外源性化学物质包括治疗性药物、环境或职业密切接触的物质等。机体对外来化合物的代谢过程包括I相反应和II相反应，I相反应主要对外来化合物进行生物转化，如：氧化、还原、水解反应。II相反应则对I相反应代谢活化后所产生的中间代谢产物与体内的化合物进行结合反应，如：谷胱甘肽结合、葡糖醛酸化等反应。一般讲外来化合物经机体代谢后毒性降低或丧失，但亦有少数外来化合物经机体代谢后毒性增高，对人体产生危害。

一种毒物是否表现出对人体的毒性，不仅取决于该毒物固有的效能、与作用部位结合的特异性，还取决于机体对毒物的处置能力。研究发现95％以上的致癌物进人体内需经代谢途径激活后才能与DNA等生物大分子结合，引起早期生物学反应，最终导致癌变。在这种激活反应过程中涉及细胞色素P450，CYP450是体内重要的激活酶(又称I相酶)，所以致癌物能否引起靶细胞的癌变很大程度取决于这类酶的活性及彼此的平衡。其中依赖于细胞色素P450的单加氧酶系中的一些基因位点，如细胞色素P450 1A1(CYP1A1)、细胞色素P450 2E1(CYP2E1)、细胞色素P450 2A13(CYP2A13)，可作为评估个体毒物激活能力的标记物，在疾病发生之前，从遗传角度提示受检者毒物代谢的发生风险，提高受检者的自我保健意识。

发明内容

本实用新型的目的是提供一种使用方便、成本低的毒物激活能力指标评估试剂盒。

为了达到上述目的，本实用新型提供了一种毒物激活能力指标评估试剂盒，包括包装盒体，其特征在于，所述的包装盒体内设有口腔拭子，三个含有荧光定量PCR反应液的试管，样本保存管、含阳性对照品的试管以及含阴性对照品的试管。

与现有技术相比，本实用新型的优点是：将样本采集以及评估个体毒物激活能力的SNP位点检测试剂整合在一个试剂盒内，能够快速评估个体毒物激活能力的体征指标，使用更方便快捷，且成本更低。

本实用新型基于荧光定量PCR技术，应用具有分辨率更高、杂交特异性更强、重现性好等特点的Taqman-MGB探针，不仅检测速度快，全部反应在封闭的反应管中完成，有效避免了交叉污染，且自动化程度高，能够实时监控，提供质控标准品，使结果判读更直观。

附图说明

图1为毒物激活能力指标评估试剂盒结构示意图；

图2为细胞色素P450 1A1(CYP1A1)rs1048943被检测样本的示意图；

图3为细胞色素P450 2E1(CYP2E1)rs2031920被检测样本的示意图；

图4为细胞色素P450 2A13(CYP2A13)rs8192789被检测样本的示意图；

具体实施方式

以下结合附图和实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

如图1所示，为毒物激活能力指标评估试剂盒结构示意图，所述的毒物激活能力指标评估试剂盒，包括包装盒体1，所述的包装盒体1内设有口腔拭子2，三个含有荧光定量PCR反应液的试管4，样本保存管3、含阳性对照品的试管5以及含阴性对照品的试管6。

所述的毒物激活能力指标评估试剂盒的使用方法为：

步骤1.采集检测样品：

用口腔拭子2在被测者口腔左右两腮分别各上下刮20次，保证采集到足量的细胞样本，采集完毕，样本保存于样本保存管3中。

步骤2.采用硅胶吸附法抽提样本的基因组DNA。

步骤3：荧光定量PCR反应

三个含有荧光定量PCR反应液的试管4中所含的荧光定量PCR反应液的成分分别包含：10×PCR反应缓冲液、dNTPs、MgCl₂溶液、Taq DNA聚合酶及3个不同SNP位点的正反向引物、荧光探针。

其中，

细胞色素P450 1A1(CYP1A1)rs1048943检测引物和探针为：

正向引物：5′-agcggaagtgtatcggtgag-3′

反向引物：5′-ggtcatgtccaccttcacg-3′

带VIC荧光G型探针：tgagaccgttgccc

带FAM荧光A型探针：agaccattgcccgct

细胞色素P450 2E1(CYP2E1)rs2031920检测引物和探针为：

正向引物：5′-caagtgatttggctggattg-3′