[实用新型]检测水产品中喹诺酮类药物的ELISA试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及检测喹诺酮类药物残留量的试剂盒，特别是检测水产品中喹诺酮类药物残留量的酶联免疫检测（ELISA）试剂盒，ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)是酶联免疫吸附剂测定的简称，是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种酶免技术。 

背景技术

喹诺酮类抗菌药(4-quinolones)，又称吡酮酸类或吡啶酮酸类，是一类较新的合成抗菌药，该类药物的开发可以追溯到1962年，Lesher从合成抗疟药氯喹中分离出一种副产品-萘啶酸，喹诺酮类历经40多年的发展，共开发出了四代喹诺酮类药物，共计50多种药物。 

喹诺酮类抗菌药以细菌的脱氧核糖核酸(DNA)为靶位，通过选择性的抑制细菌DNA促旋酶与拓扑异构酶Ⅳ而造成染色体的不可逆损害，而使细菌细胞不再分裂，主要作用于革兰阴性菌的抗菌药物，对革兰阳性菌的作用较弱(某些品种对金黄色葡萄球菌有较好的抗菌作用)。已成为兽医临诊和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，被大量用于治疗、预防和促生长，由于其耐药性和潜在的致癌性引起广泛的关注。在组织中，恩诺沙星的标示残留物为恩诺沙星和环丙沙星，其中以肝脏组织和肾脏组织中的残留物浓度最高，其次是肌肉和脂肪附着的皮肤组织，恩诺沙星其代谢产物环丙沙星（CIF）仍具有生物活性。氧氟沙星（OFL）其主要以原形药物的形式存在于组织中；培氟沙星（PEF）在体内代谢率接近100%，而其代谢产物是诺氟沙星（NOR）。 

本试剂盒是应用ELISA 技术研发的新一代药物残留检测产品，与高效液相等仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点，能最大限度地减少操作误差和工作强度。 

实用新型内容

本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的喹诺酮类药物残留量检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，需要的技术含量不高，可进行一次连续多个样品中喹诺酮类药物残留量的测定，减少了检测样本所需要的时间。 

本实用新型的技术方案是：一种检测水产品中喹诺酮类药物残留量的酶联免疫试剂盒，试剂盒采用间接竞争ELISA 方法，在酶标板微孔中预包被偶联抗原，样本中残留的喹诺酮类药物和微孔中预包被的偶联抗原竞争抗喹诺酮类药物抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留喹诺酮类药物的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中喹诺酮类药物的残留量。 

本实用新型所提供的一种检测水产品中喹诺酮类药物的ELISA试剂盒，包括盒体和盒内的一块96孔的酶标板、14瓶试剂，其特征在于：酶标板是采用96孔试剂板作为固相载体， 在试剂盒微孔中预包被喹诺酮类药物偶联抗原制成的检测板，14瓶试剂分别为7瓶喹诺酮类药物标准品溶液、酶标二抗、抗体工作液、显色液A液、显色液B液、终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液。 

还包括一张盖板膜和放试剂的下凹瓶位、一个自封袋、一份说明书和一份质检报告，盒体是硬纸盒；96孔试剂板为聚苯乙烯酶标板，放于真空铝铂袋内；盖板膜是塑料硬膜；标准品溶液和高浓度标准品溶液均用黑色帽的白色PE塑料瓶，酶标二抗用红色帽的白色PE塑料瓶，抗体工作液用绿色帽的白色PE塑料瓶，显色液A液用白色帽的白色PE塑料瓶，显色液B液用红色帽的黑色PE塑料瓶，终止液用黄色帽的白色PE塑料瓶，浓缩洗涤液用透明帽的半透明PE塑料瓶，浓缩复溶液用蓝色帽的半透明PE塑料瓶，下凹瓶位共15个，由塑料泡沫制成。 

酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔，每个反应孔预包被喹诺酮类药物偶联抗原；盖板膜大小与酶标板横切面大小一致；标准品溶液7瓶，1m1/瓶；酶标二抗1瓶，7m1；抗体工作液1瓶，7m1；显色液A液1瓶，7m1；显色液B液1瓶，7m1；终止液1瓶，7m1；浓缩洗涤液1瓶，40m1；浓缩复溶液1瓶，50ml。 

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：水产品样本的最低检测限为1.0μg/kg，回收率为80%±20%，相对于其他喹诺酮类药物检测方法，本试剂盒所需仪器较少，且所需仪器同类实验室一般均有配备，所需成本较低。 

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于水产品中喹诺酮类药物残留量的检测。 

附图说明

图1为本实用新型酶标板的侧面纵剖面图(长为8. 55cm)； 

图2为本实用新型酶标板的侧面横剖面图(长为12. 8cm)； 

图3为本实用新型酶标板的俯视图；