[实用新型]猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒。

背景技术

猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒都能够不同程度的导致妊娠母猪的繁殖障碍，引起母猪流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等，在猪群中具传播快、胚胎致死率高、流行范围广、传播途径多、病原体顽固等特点，每年给养猪业造成了巨大损失。而且经常混合感染，靠中和试验和分离病毒来确诊容易造成假阴性，而且操作繁琐，所需时间长，寻求一种操作简单、快速的检测、鉴别诊断方法是防制这类疾病的基础。使用PCR诊断试剂盒快速、灵敏、准确、安全、简单、应用范围广、取样及样品处理方便。

但是。目前广泛使用的诊断试剂盒其盒体壁仅为一层硬纸板，抗挤压能力差，在运输过程中往往会因为挤压原因而损坏，造成试剂盒内的试剂瓶破坏，影响试剂使用的安全性。

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题是提供一种猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒。

本实用新型的技术方案是：猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内设有衬垫，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔，盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层、硬纸板层、哑膜层、塑料膜层。

所述诊断试剂包括PCR缓冲液、引物、酶、超纯水、检测PCR管。

本实用新型的有益效果是：本实用新型盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层、硬纸板层、哑膜层、塑料膜层，抗菌，防潮，轻度好，抗挤压能力强，保证了试剂盒的使用安全。

附图说明

图1为本实用新型展开示意图；

图2为图1中A-A剖视图；

图3为图2中B处局部放大图。

具体实施方式

猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体1和盒盖4，盒体1内设有衬垫2，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔3，诊断试剂包括PCR缓冲液、引物、酶、超纯水、检测PCR管，可以根据需要设定容器孔的大小和数量。盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层11、硬纸板层12、哑膜层13、塑料膜层14。

猪圆环病毒引物的序列如下：上游引物 P1：5＇-TAA CTA CTC CTC CCG CCA TAC-3＇；下游引物 P2：5＇-GCC TAC GTG GTC TAC ATT TCC-3＇；猪细小病毒引物的序列如下：上游引物 P3：5＇-TGG GAG GGC TTG GTT AGA-3＇；下游引物 P4：5＇-TGG TGG TGA GGT TGC TGA T-3＇；猪伪狂犬病毒引物的序列如下：上游引物 P5：5＇-CGT GGA ACG AGC CCT TCA G-3＇；下游引物 P6：5＇-AGA GCG GGT TGG CGA TGT-3＇。利用上述引物检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒的多重SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，按如下SYBR GreenⅠ实时荧光PCR反应体系和SYBR GreenⅠ实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。所述SYBR GreenⅠ实时荧光PCR反应体系，在25 μl体系中加入以下成份：SYBR GreenⅠPreMix 17 μl；P1∕P3 ∕P5 0.5+0.5+0.5 μl；P2∕P4 ∕P6  0.5+0.5+0.5 μl；DNA 1+1+1 μl；ddH₂O  2 μl。所述SYBR GreenⅠ实时荧光PCR扩增程序为：95℃预变性5min；进入循环，95℃变性15s，55℃退火20 s，72℃延伸20s，40个循环；反应结束后先加热至95℃，然后再降至65℃，开始以0.5℃/s递增至95℃检测荧光信号得出扩增产物的溶解曲线。