[发明专利]基于电极阵列的多参数电化学免疫传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种基于电极阵列的多参数电化学免疫传感器，其包括：检测电极阵列(1)、电化学参比电极(2)、对电极(3)、引线(4)、插口(6)以及衬底(5)；其中，所述检测电极阵列(1)包括多个检测电极，所述检测电极为免疫电化学电极，用于检测多种疾病标志物。

2.根据权利要求1所述的基于电极阵列的多参数电化学免疫传感器，其特征在于：所述检测电极阵列(1)中的每一个电极表面均固定有电子媒介体、多孔屏蔽膜、纳米材料和抗体；所述检测电极采用MEMS工艺制备，且采用超声或等离子方法进行清洗。

3.根据权利要求1所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器，其特征在于：每一个检测电极均有配套的对电极(3)和电化学参比电极(2)，其中所述对电极用于提供电流回路，所述电化学参比电极用于提供参考电位并保持电位稳定。

4.根据权利要求1所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器，其特征在于：所述衬底所使用的材料为生物相容性好的有机或无机绝缘材料；所述检测电极阵列中的检测电极、电化学参比电极和对电极选用生物相容性好的金属或金属化合物导电薄膜。

5.根据权利要求4所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器，其特征在于：所述衬底选用二氧化硅、氮化硅、氮氧硅、SU8、聚酰亚胺或聚对二甲苯其中之一；所述电极选用金、铂、氮化钛或铟锡氧化物其中之一。

6.一种如权利要求1所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器的制备方法，该方法包括：

步骤1、以塑料基片作为衬底，在其保护膜上刻蚀检测电极阵列、参考电极和对电极的掩膜图案，并在其上溅射过渡层和电极层；

步骤2、在参比电极和对电极上间隔丝印银和氯化银的混合浆料，形成集成化的银和氯化银参比电极和对电极；

步骤3、将电子媒介体固定在检测电极阵列中的检测电极上形成电子媒介体膜，采用纳米金颗粒作为添加剂，然后通过全氟化磺酸树脂的成膜作用将全氟化磺酸树脂|纳米金混合材料nafion-AuNPs膜固定于电子媒介体膜上形成混有纳米材料的多孔屏蔽膜；

步骤4、在三个检测电极上分别固定不同的疾病标志物抗体。

7.根据权利要求6所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于：所述电子媒介体为铁氰化钾。

8.根据权利要求6所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤1中，在溅射完过渡层和电极层后，将所述塑料基片放入等离子体刻蚀机中，通入O₂和N₂进行清洗，所述等离子体刻蚀机的工作气压为3.0Pa，所通入的O₂流量为40ml/分钟，N₂流量120ml/分钟。

9.根据权利要求6所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤4中在检测电极上固定的疾病标志物抗体为癌症标志物抗体，包括癌胚抗原、神经元特异性烯醇化酶和细胞角蛋白片段，其固定过程如下：

步骤41：采用不锈钢掩膜板，覆盖住参比电极、对电极及其中两个检测电极，只露出剩下的一个检测电极，利用静电吸附的办法将正电的聚乙烯亚胺PEI吸附到带负电的检测电极的全氟化磺酸树脂表面形成PEI膜，再通过戊二醛连接所述PEI膜和癌胚抗原单克隆抗体，形成一个癌胚抗原检测电极，以用于检测癌胚抗原；

步骤42：更换不锈钢掩膜板，重复上一步，在其他两个检测电极上分别固定神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体和神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体，分别用于检测神经元特异性烯醇化酶和神经元特异性烯醇化酶。

10.根据权利要求9所述的基于电极阵列的多参数肺癌电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述在检测电极上分别固定癌胚抗原、神经元特异性烯醇化酶和细胞角蛋白片段后，该方法还包括：

步骤5、将制备好的所述电化学免疫传感器置于BSA溶液中封闭其上残留的戊二醛活性基团，并在其表面贴上绝缘膜。