[发明专利]一种甲基营养型芽孢杆菌的生物菌剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于植物病害生物防治领域，特别是利用有益微生物对植物病害进行生物防治，具体涉及甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)，以及利用该菌株制备生物菌剂以及所述生物菌剂防治植物病害的应用。 

背景技术

植物病害的流行不但引起作物减产，给人类造成重大经济损失，甚至带来灾难性后果。植物病害的危害还会导致农产品品质低劣，不堪使用或加工，甚至导致人畜中毒。在植物病害的防治中，化学农药因为具有成本低、见效快、省时省力等优点曾一度成为人们的首选，但是，化学农药一般不可降解，随着化学农药的大量使用，引发了环境污染、生态破坏、食品污染等事件。这使研究开发利用生物农药成为植物保护工作者的重要研究课题。生物农药是指利用生物活体或其代谢产物针对农业有害生物进行杀灭或抑制的制剂，具有安全、高效、无污染等特点，与保护生态环境和社会协调发展的要求相吻合，是未来农药发展的必然趋势。 

微生物农药是生物农药中应用最为广泛的一类，也是生物防治的重要材料。微生物源农药的主要成分是微生物活体及其次生代谢产物，由于微生物种类多样，其活性也很广泛，包括杀虫、杀菌、除草以及植物生长调节作用等。自然界中用于生防细菌的，主要有芽孢杆菌属、假单胞菌属。特别是近几年，利用微生物防治植物真菌性病害由于对环境安全，可以减缓病原菌产生抗药性，已经成为当前防治植物病害的主流方法。 

甲基营养型芽孢杆菌是一种嗜温、好氧、产芽孢的杆状细菌，其生理特征多样，该菌在自然界中广泛存在，具有独特的一碳代谢途径，能够将自然界中取之不尽的一碳化合物如甲醇、甲醛等转变为菌体自身所需的营养物质，同时又会产生多种有益的代谢副产物L.丝氨酸、维生素B12、聚p羟基丁酸盐等。对人畜无毒无害，不污染环 境，具备生命力强，繁殖快速能产生多种抗菌素和酶，具有抗菌活性和极强的抗高温、抗强酸强碱能力。甲基营养型芽孢杆菌不仅可以在土壤、植物根际体表等外界环境中广泛存在，而且是植物体内常见内生细菌，尤其是在植物的根、茎内部。甲基营养型芽孢杆菌通过成功定殖于烟草、水稻等植物根际、体表或体内，改变其周围菌群环境和种类，与病原菌竞争植物周围的位点，并且分泌多种抗菌物质以抑制病原菌生长，同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，从而达到改良土壤和生防的目的，具有防病和促生作用。 

烟草青枯病是一种由青枯劳尔氏菌(Ralatonia solanacearum)引起的、以土壤传播为主的、毁灭性的细菌性病害。此病是热带、亚热带地区烟草的主要病害之一，在我国长江流域及其以南烟区普遍发生，其中以广东、福建、湖南、四川及贵州烟区危害较重。目前，在生产中主要采用化学农药防治，但是无法有效防止该病发生，而且长期大量施用化学农药既容易使病菌产生抗药性，又容易造成严重的环境污染。 

水稻白叶枯病是由革兰氏阴性菌黄单胞杆菌水稻变种(Xanthomonas oryzaepv.oryzae，Xoo)引起的，是水稻三大病害之一，在世界上几乎所有的水稻种植区均有发生，我国除新疆、西藏和东北的北部以外均有不同程度的发生，长江以南和江淮平原籼稻产区是常发区，严重影响水稻产量，目前主要依赖化学农药防治，但是长期使用，使病菌容易产生抗药性，并且严重污染环境。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的甲基营养型芽孢杆菌。 

本发明的另一目的在于提供所述甲基营养型芽孢杆菌的发酵方法，以及由该方法制备所得的发酵产物。 

本发明的另一目的在于提供甲基营养型芽孢杆菌的生物菌剂及其制备方法。 

本发明的另一目的在于提供利用所述甲基营养型芽孢杆菌的生物菌剂防治植物病害的用途。 

本发明的目的是通过以下技术方案实现的： 

一种甲基营养型芽孢杆菌，其属于芽孢杆菌属，其命名为Bacillus methylotrophicus；保藏登记号为CGMCCNo.6793，保藏机构为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区大屯路；保藏时间为2012年11月07日。 

本发明的上述甲基营养型芽孢杆菌是从烟草根际土壤分离得到的，通过菌株的分离、纯化以及筛选步骤获得的。 

菌株鉴定：采用形态特征、生理生化实验、分子生物学鉴定法，以及16SrDNA同源序列比对分析最终确定上述保藏编号的菌株为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophilus)。 

本发明所述甲基营养型芽孢杆菌的发酵方法，所述方法包括下述步骤：