[发明专利]大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种从大越豆芋花中同时制备皂苷和多糖的方法及其用途。

背景技术

大越豆芋（Apios americana Medikus）属多年生豆科植物，又称Potato bean、American ground nut，缠绕藤本，5-7片小叶一复叶，紫色小花，蝶形花冠，原产于美国西部，地下块茎作为无性繁殖或食用，是一种天然的高蛋白、高钙食品。由于具有其极高的营养和保健作用60年代被日本政府引进和开发，并被广泛应用于各种食品或食品配料中，已经成为日本家喻户晓的保健食品，主要对现代生活方式病(如高血压、糖尿病、肥胖、骨质疏松等)具有明显改善效果，并具有抗癌和抗HIV活性成分。目前，大越豆芋已成功引种至中国，在浙江省杭州地区、宁波地区、温州地区、金华地区均有栽培和利用。但目前，未发现有对大越豆芋皂苷和多糖的提取方法与用途的相关报道。此外，大越豆芋花目前基本处于废弃状态，未能开发利用，造成了资源的浪费。

目前在别的植物上有皂苷和多糖同时提取的工艺的报道，如中国专利（申请号：201110029129.1，申请公布号CN102178720A）公开了一种从绞股蓝中同时制备总皂营和多糖的方法，但存在纯度低等方面的不足。

发明内容

本发明的目的是提供一种成本低、原料综合利用，并且对环境污染小的同时制备豆芋花皂苷和多糖的方法，并提供用该方法制备的大越豆芋花皂苷和多糖在制备具有抗氧化、血糖调节作用的药物或功能食品中的应用。

本发明的技术方案如下：

大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法，其特征在于按以下步骤：

1）采摘大越豆芋花，清洗，干燥，粉碎，过40目筛，得到大越豆芋花粉末；

2）大越豆芋花粉末，按照料液比1:10-1:20，加入浓度为70%-90%乙醇，在50-80℃回流提取1-3次，每次时间1-3小时，过滤，得上清液和滤渣；

3）上清液，挥干后用水溶解，石油醚脱脂，正丁醇萃取，取正丁醇部分经大孔吸附树脂吸附洗脱后，浓缩，干燥得到豆芋花皂苷粉；

4）滤渣，挥干溶媒，用其重量10-20倍的蒸馏水，于70-90℃回流提取1-3次，每次时间2-3小时，过滤，收集合并滤过液；

5）滤过液脱色、脱蛋白，浓缩，加入乙醇，静置过夜进行醇沉，收集沉淀，透析后，用DEAE-纤维素柱层析，分别用蒸馏水、0.1M，0.3M，0.5M NaCl溶液洗脱液，收集0.3M-0.5M NaCl洗脱液，透析，浓缩，干燥，得豆芋花多糖。

所述的大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法，其特征在于步骤2）所述料液比为1:15-1:20，优选为1:20；乙醇浓度为80-90%，优选90%；回流提取温度为60-70℃，优选70℃；回流提取2次，每次时间2小时。

所述的大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法，其特征在于步骤3）所述的大孔吸附树脂为D101或AB-8，洗脱所采用的洗脱液为质量浓度为60%-90%的乙醇。

所述的大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法，其特征在于步骤5）所述的脱色方法为活性炭脱色或过氧化氢脱色；所述的脱蛋白方法为sevage法、三氯乙酸法、氯化钠法或氯化钙法；所述的醇沉为加入乙醇使醇沉浓度为75-95%；所述透析采用3KD透析膜。

所述的大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法，其特征在于步骤1）、步骤3）和步骤5）所述的干燥方法为冷冻干燥或真空干燥。

所述的大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法，其特征在于所述洗脱液为质量浓度75%的乙醇。

所述的大越豆芋花总皂苷、多糖同时制备的方法，其特征在于醇沉浓度为90-95%。

上述方法同时制备了大越豆芋花总皂苷和多糖，制备得到的大越豆芋花皂苷和多糖可达到较高的提取率和纯度，其中大越豆芋花皂苷产量可达到2-3.5%，纯度为90-97%；大越豆芋花多糖产量可达到0.5-2%，纯度为94-98%。

制备得到的大越豆芋花总皂苷可以作为制备抗氧化活性的药物或功能食品添加剂，大越豆芋花多糖可以作为制备调节血糖的药物或功能食品添加剂，如大越豆芋花多糖用于制备治疗糖尿病等药物。上述制备方法提取的活性成分作为清除自由基、调节血糖、血脂等药品和功能食品配料使用，疗效好，应用范围广，安全无毒性，大越豆芋花活性成分作为一类天然药物、保健食品功能因子、膳食补充剂的绿色宝库，若能加以开发利用，可以为开发抗氧化剂，调节血糖紊乱提供新途径，也对发展我国的区域经济和人民的健康提供技术支持。