[发明专利]一种腺病毒抗原临界值质控物的配制方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种室内质控物的配置方法，尤其涉及一种腺病毒抗原临界值质控物的配制方法。

【背景技术】

腺病毒对呼吸道、胃肠道、尿道和膀胱、眼、肝脏等均可感染。

呼吸道感染：呼吸道感染的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎，同时伴有发热、寒战、头痛和肌肉痛等，包括以下4种不同的综合征：

1.急性发热性咽喉炎通常为婴儿和儿童发病，由C组病毒引起，出现咳嗽，鼻塞、发热和咽喉部溃疡等症状，这些表现难以与其他病毒引起的轻型呼吸道感染鉴别。

2.咽结膜热(pharyngoconjunctival fever)症状与急性发热性咽喉炎相似，但常同时发生结膜炎。咽结膜热有暴发流行倾向，如游泳池结膜炎，多由B组腺病毒3和7型所致，愈后尚好，一般无后遗症。

3.急性呼吸道疾病(acute respiratory diseases，ARD)这一综合征由咽炎、发热、咳嗽和全身不适为特点，常在军队的新兵中流行，多因突然紧张、劳累、聚集等所致。此感染多由腺病毒4、7型引起，也可见于3型。

4、腺病毒肺炎约占儿童期肺炎的10％，多由腺病毒3、7型引起；在青年人腺病毒肺炎的病死率为8％～10％；肺炎也是新兵急性呼吸道疾病的一种严重表现。

胃肠炎：40型和41型腺病毒可引起婴幼儿与年少(4岁以下)儿童的胃肠炎，致腹痛、腹泻。C组腺病毒能引起某些婴幼儿肠套叠。

其他疾患：腺病毒11、12型能引起儿童急性出血性膀胱炎，尿中出现病毒。37型可引起女性宫颈炎和男性尿道炎，常由性传播感染。在免疫功能低下者可引起偶发或严重的病毒感染，尤其在器官移植病人中发生严重呼吸道感染和病毒性肝炎，多由1、5和7型腺病毒引起。艾滋病患者可感染多种血清型腺病毒，并能出现抗原性介于中间的杂合型毒株，而且常为致死性腺病毒感染。主要原因是腺病毒的E1A蛋白可反式激活HIV的转录，加速HIV的复制。临床发现37％的艾滋病患者病毒性腹泻是由腺病毒所致。腺病毒抗原检测是诊断该病的常用方法，其检测方法有多种，其中金标法因其灵敏度、特异性与酶联免疫法相当，省时、省力，不需特殊设备，故在临床中被广泛应用。

目前，多数定量检测(如谷丙转氨酶活性测定等)已有商品化质控物，但腺病毒抗原检测(金标定性法)没有商品化质控物，如不自行配制就难以开展室内质控，为监测检验试剂的灵敏度，防止假阴性出现，定性试验的阳性质控物一般采用弱阳性样本，检验试剂灵敏度稍微下降即可通过使用该质控物反应出来，而高浓度质控物不利于监测试剂灵敏度，且使用的原材料多。

【发明内容】

本发明的目的是提供一种腺病毒抗原临界值质控物的配制方法，本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种腺病毒抗原临界值质控物的配制方法，包括如下步骤：

(1)质控物容器封闭处理：将0.5ml规格的离心管用0.5％至2.0％的小牛血清白蛋白加满，放置于4℃冰箱内，封闭24小时后，然后弃悼所述离心管管内液体，再将所述离心管放置于生物安全柜内自然凉干备用；

(2)配制临界质控物：在收集到的腺病毒抗原阳性的粪便标本中加适量生理盐水，充分混匀，移至20ml离心管内，用3000转/分的转速离心5分钟，收集上清液置56℃灭活30分钟，用倍比稀释法以腺病毒抗原检测出极弱阳性的稀释度作为最大稀释度，将离心管上清液用无菌生理盐水稀释至2倍最大稀释度浓度，加蛋白稳定剂、叠氮钠至终浓度分别为1.0-10.0g/L、0.3-3.0g/L，再分装至封闭后的0.5ml塑料离心管内，每管50-500μl；

(3)质控物保存：将分装好的临界值质控物保存于4℃至-20℃条件下。

进一步地，所述离心管为塑料离心管。

本发明的有益效果在于：本发明的被测物浓度设计在临界值水平，检验试剂灵敏度稍微下降即可通过使用该质控物反应出来，可监测相应试剂在流通、保存、使用过程中是否出现变质，临界值质控物因被测物含量很低，容易在保存过程中降解和被塑料离心管壁吸附，本发明制备的腺病毒抗原临界值质控物，因预先将一次性塑料离心管进行了封闭处理，并加入了防腐剂和蛋白稳定剂，通过低温保存措施，有效期大于一年。

【具体实施方式】

下面根据具体实施方式对本发明做进一步描述：

实施例1：

一种腺病毒抗原临界值质控物的配制方法，包括如下步骤