[发明专利]妊娠后期营养受限绵羊IUGR实验模型

说明书

技术领域

本发明涉及动物实验模型，特别指一种妊娠后期营养受限绵羊IUGR实验模型。

背景技术

IUGR(Intrauterine Growth Retardation的缩写)通常指哺乳动物妊娠期胎儿自身生长发育受阻，它严重影响胎儿的生长发育，并与出生后高发病率和死亡率密切相关。母体营养限制引起的胎儿营养供应同步化限制，不仅导致胎儿神经内分泌和代谢的适应性变化，而且一些重要组织器官(如心脏、肺脏、肝脏和肾脏、胃肠道、脾脏和胸腺等)的相对生长发育模式发生改变，结构和生理功能也不同程度受到影响，最终导致动物成年后冠心病、高血压、糖尿病、肾病、繁殖器官发育障碍、肺病、代谢综合症、自身免疫缺陷病等的发生。因此，IUGR不仅是世界范围内共同关注的健康性社会问题，也是世界各国生物医学领域亟待攻克的重大难点课题。因此，建立以揭示动物成年后疾病胎儿起源机理为目的的IUGR实验动物模型显得至关重要。

近年来国内外科学家从IUGR的病因病理、动物模型建立及防治等各个方面进行了一定的研究。目前，该领域在国内外的研究中尚未建立完善的反刍动物模型，尤其作为胎儿发育快速生长期的妊娠后期反刍动物IUGR实验模型仍未有针对性开展。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种妊娠后期营养受限绵羊IUGR实验模型，本实验模型以绵羊为实验动物，目的是为该领域的科研提供IUGR实验模型，从而解决农业及医学相关的课题。

本发明要解决的技术问题由如下方案来实现：本实验模型依据绵羊胎儿生长发育的3/4在妊娠期最后两个月内完成的事实，并基于母体营养限制可引起胎儿营养供应的同步化限制，通过饲喂三种不同营养水平组的群体试验，即可获得二种不同程度的IUGR绵羊胎儿，并确定妊娠后期母羊营养受限不影响其所产羔羊补偿生长能力的最低供给值0.33MJ·kg^-0.75·d^-1(阈值：即能量摄入为自由采食代谢能的50％)以及IUGR绵羊胎儿出生后生长发育的改变，本实验模型设定三个能量水平组：对照组(自由采食)；限制1组(0.33MJ·kg^-0.75，即能量摄入为自由采食代谢能的50％)；限制2组(0.20MJ·kg^-0.75·d^-1，即能量摄入为自由采食代谢能的30％)。从妊娠期90天时开始对试验绵羊进行不同营养水平的饲养。限制期母羊的采食量根据羊只代谢体重及所用饲草营养组成等求得，公式如下：

(1)DI×DM％×ME_饲草＝L_{限制能量水平}×W^0.75

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具体包括以下步骤：

(1)实验动物选择：选择体况中等、2～4胎次、健康的母羊n只(根据研究效果及其他因素确定数量，一般每组不低于8只妊娠母羊，确保实验的代表性及准确度)，进行检疫、驱虫、防疫、消毒；

(2)实验动物妊娠状况先期检测：采用B超仪分析确定未孕母羊，淘汰已受孕母羊；

(3)同期发情：对健康未孕的绵羊采用阴道栓塞技术进行同期发情，每只母羊投放CIDR一枚，投放后第11天肌肉注射孕马血清、第12天取出CIDR并清洗母羊阴道，肌肉注射青霉素、链霉素预防感染，公羊试情，确定发情后人工授精或与公羊进行本交同期受孕，在下一发情期根据返情羊初步确定妊娠羊只数；

(4)妊娠确定：在妊娠50～60天时采用B超仪分析确定妊娠母羊，淘汰未受孕母羊；

(5)营养水平设定：羊只采食饲料为当年青干草，依据模型分组，分为三组：对照组：自由采食；限制1组：阈值水平组；0.33MJ·kg^-0.75，即能量摄入为自由采食代谢能的50％；限制2组：低于阈值水平组；0.20MJ·kg^-0.75·d^-1，即能量摄入为自由采食代谢能的30％；

(6)饲喂方法：饲喂从妊娠90天开始，采用单笼饲养或人工套袋法，饲草长度为3～5cm，1周的适应期后，维持设定营养水平饲草供给量不变，限伺组羊分别于9:00、21:00两次饲喂；对照组自由采食，且剩草量不低于饲喂量的15％，各组自由饮水，自由添食盐砖，所述模型动物限饲时长不低于40天。