[发明专利]乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌固态微生态制剂的制备方法

权利要求书

1.一种乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌固态微生态制剂的制备方法，其特征在于：它包括三大步骤，液体菌液的培养、固体基料的配制、固体基料与液体菌液的混匀，具体制备步骤为：把固体基料与液体菌液按重量比为1：1的比例混合，搅拌均匀后装盘，入无菌培养室，恒温40℃，通风，浅盘发酵36小时，可见浅盘表面和内层均长满白色菌体，提高温度至60℃，加大风量，干燥出料，测得活菌浓度1×10⁹cfu/g，粉碎分装，即得产品。

2.根据权利要求1所述的乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌固态微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述液体菌液的培养包括以下具体步骤：

一、平板培养：乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌保存菌种划线接种至平板培养基，其培养基配料为葡萄糖12g，蛋白胨4g，牛肉膏3g，NaCl 5g，MnSO₄·H₂O 5mg，琼脂 15g，蒸馏水1000ml，PH值为7，121℃灭菌，32℃培养30h；

二、试管接种：取发育健壮、菌落典型的菌株接种10ml，其培养基配料为葡萄糖12g，蛋白胨4g，牛肉膏3g，氯化钠5g，硫酸锰5mg，蒸馏水1000ml，PH值为7，121℃灭菌，35℃培养24h；

三、分别用三角瓶接种100ml，其培养基同步骤二，121℃灭菌，35℃培养12h；

四、分别用三角瓶接种1000ml，其培养基同步骤三；

五、用10L种子发酵罐培养，培养液为7L，培养基同步骤三，PH值为6，121℃灭菌30分钟，培养温度为37℃，转速150r/min，通气量2vvm，指每分钟通入单位发酵体积m³的空气体积m³，培养18h；再厌氧培养12h；

六、用100L种子发酵罐培养，培养液为100L，培养基按豆粕粉3g，鱼粉2g，120目的玉米粉0.5g，葡萄糖3g，氯化钠0.2g，硫酸锰0.3g，增效剂0.1g，水1000ml的比例配制，按步骤五的方法培养，所选增效剂为硫酸锌、硫酸铁和硫酸铜按等量配比而成；

七、1000L发酵罐，培养基分别以步骤六中100L种子发酵罐的配比乘以七倍，发酵方法同步骤五，培养24h。

3.根据权利要求1所述的乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌固态微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述固体基料按以下成分配制：花生壳或棉籽壳500kg，玉米粉150kg，豆粕粉200kg，麸皮100kg，葡萄糖5kg，总重量为1000kg，搅拌混匀后加200kg水润湿后蒸煮灭菌，待冷却至35℃时，加入液体菌液的培养的步骤七中的发酵液700kg。