[发明专利]一种GM-CSF-HER2重组蛋白及其方法和应用无效

专利信息
申请号: 201210544431.5 申请日: 2012-12-14
公开(公告)号: CN102993312A 公开(公告)日: 2013-03-27
发明(设计)人: 张超;叶永清;苏国新 申请(专利权)人: 上海柯莱逊生物技术有限公司
主分类号: C07K19/00 分类号: C07K19/00;C12N15/85;A61K39/00;A61P35/00
代理公司: 上海三方专利事务所 31127 代理人: 吴干权;钱品兴
地址: 201201 上海市浦东新区张江*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 gm csf her2 重组 蛋白 及其 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种GM-CSF- HER2重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种制备权利要求1所述重组蛋白的方法,其特征在于该方法由以下步骤组成:

a.将GM-CSF的基因序列和HER2的基因序列通过酶切克隆到质粒pCEP4中构建重组质粒,

b.重组质粒转染人胚胎肾293细胞进行重组蛋白的表达,

c.纯化收集所述的重组蛋白。

3.如权利要求2所述的制备重组蛋白的方法,其特征在于所述的酶切为:在GM-CSF的基因序列两端添加酶切点位Hind III和Xho I,在HER2的基因序列两端添加酶切点位Xho I和BamH I。

4.如权利要求2所述的制备重组蛋白的方法,其特征在于通过Ni-NTA柱进行所述的分离纯化。

5.一种权利要求1所述重组蛋白用于肿瘤治疗药物的应用。

6.如权利要求5所述的重组蛋白用于治疗肿瘤药物的应用,其特征在于所述的肿瘤为乳腺癌。

7.一种权利要求1所述重组蛋白制备DC疫苗的方法,其特征在于用所述的重组蛋白刺激诱导健康C57BL/6小鼠经由骨髓制备的DC细胞,制得DC疫苗。

8.如权利要求7所述重组蛋白制备DC疫苗的方法,其特征在于用于刺激诱导的重组蛋白的浓度为25~100ug/ml。

9.如权利要求7所述重组蛋白制备DC疫苗的方法,其特征在于用于刺激诱导的重组蛋白的浓度为25~50ug/ml。

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