[发明专利]稳定的扶正解毒超微粉中淫羊藿苷含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱方法，特别涉及一种中药成分的含量测定技术。

 

背景技术

[0002] 扶正解毒超微粉是根据《中华人民共和国兽药典》2010版二部扶正解毒散项下规定，由黄芪、板蓝根和淫羊藿三味中药按一定比例组合超微粉碎而成的成方制剂，具有扶正祛邪、清热解毒的功效。主治鸡法氏囊病。

超微粉碎是近20年迅速发展起来的一项高新技术，用于中药领域能把原材料加工成微米甚至纳米级的微粉。鉴于粉碎是中药生产及应用中的基本加工技术，超微粉碎也愈来愈引起人们的关注，虽然在中药制药行业中起步较晚，开发研制的品种相对较少，但已显露出特有的优势和广阔的应用前景，并已成为近几年来中药界的研究热点。

超微粉碎中药最大的优势是有效提高了药物的生物利用度。从药物学原理来说，药物的溶出速度与药物的颗粒比表面积呈正相关，而比表面积与颗粒粒径成反比。因此，药物的粒径越小，则其表面积越大，越有助于药物有效成分的溶出。超微粉碎中药及其颗粒达到超细粉末的水平，其比表面积显著增大，药物在胃肠道里的溶解度明显增加，从而增加药物的生物利用度，并加快药物起效时间。此外，由于纳米或微米粒的粘附性及小的粒径，既有利于延长局部用药时滞留性的增加，也有利于延长药物与肠壁接触时间，加大接触面积，从而提高药物口服吸收的生物利用度。如甘草饮片超微粉碎后甘草酸的溶出有显著增加。传统中药饮片往往采用煎煮的方法，目前虽已进行了中药制剂的改良，但只是提取中药所含的小部分成分，占总成分的10％～30％，药效大受影响。使用超微粉碎技术可充分提取中药成分，具有吸收快及使用方便等优点。

药典中扶正解毒散项下质量标准未规定其各有效成分的鉴别方法和含量测定方法，为了完善扶正解毒散质量标准，为其质量标准的制定提供依据，本发明对扶正解毒超微粉中淫羊藿的成分淫羊藿苷进行含量测定方法的探索，并确定一种稳定的扶正解毒超微粉中淫羊藿苷含量测定方法。

发明内容

本发明旨在解决扶正解毒超微粉中淫羊藿苷含量测定问题，以完善扶正解毒超微粉质量标准，用以检测扶正解毒超微粉中淫羊藿苷的含量。

具体方法技术方案如下：

一种高效液相色谱法测定扶正解毒超微粉中淫羊藿苷含量的方法，其色谱条件为：

a. 填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；

b. 流动相为混合比例为30:70的乙腈和水；

c. 紫外检测器的检测波长为270nm。

d. 所用流动相流速为1ml/min；

e. 进样体积为10μl。

1. 淫羊藿苷标准曲线的绘制

a. 标准品溶液的制备：精密称淫羊藿苷标准品0.01017g，置于100ml容量瓶中，用甲醇溶解，定容至100ml。

b. 用甲醇稀释不同浓度的标准品溶液：精密量取原浓度标准品溶液5ml，加甲醇定容至10ml，混匀后，再精密量取5ml至另一容量瓶中，加甲醇定容至10ml，按照此方法倍比稀释，制成浓度分别为101.7μg/ml、50.85μg/ml、25.43μg/ml、12.71μg/ml、6.35μg/ml的淫羊藿苷标准品溶液。

c. 以不同浓度的淫羊藿苷标准品溶液响应的峰面积对浓度作图，得到淫羊藿苷的标准曲线。见附图。

2. 供试品的制备

取扶正解毒超微粉约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20ml，密塞，称定重量，超声处理1小时，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3. 精密度试验

取供试品溶液，精密吸取10μl进样，重复5次，记录峰面积，计算该方法精密度。试验结果见表。

表 淫羊藿苷含量测定方法精密度试验结果

由结果可见，淫羊藿苷的相对标准偏差为0.29%，表明本方法的进样精密度良好。

4. 方法的专属性试验

阴性样品溶液：精密称取除淫羊藿外扶正解毒超微粉约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20ml，密塞，称定重量，超声处理1小时，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

对照品溶液：取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

5. 回收率试验