[发明专利]能够缓释氮和吸附-生物降解石油烃的微球颗粒制备方法

权利要求书

1.一种能够缓释氮和吸附-生物降解石油烃的微球颗粒制备方法，其特征在于，该方法的具体步骤如下：

(1)配制质量分数为50％的尿素水溶液，配制质量分数为30％的甲醛水溶液；按尿素水溶液与甲醛水溶液的体积比为6.5∶1的比例，将尿素水溶液移入到A容器中，甲醛水溶液移入到B容器中；

(2)将步骤(1)A容器中尿素水溶液和B容器中甲醛水溶液置于45℃水浴中恒温30～40分钟；

(3)向步骤(2)的尿素水溶液中在1000r/min搅拌条件下滴加摩尔浓度为0.01mol/L的NaOH溶液和摩尔浓度为0.005mol/L的HCl溶液，使溶液的pH值为7.2～7.4；

(4)将步骤(2)中的甲醛水溶液在1000r/min搅拌条件下加入到步骤(3)中的尿素水溶液中，然后置于45℃水浴中在1000r/min条件下搅拌90～100分钟；

(5)将步骤(4)的混合溶液中在1000r/min搅拌条件下滴加摩尔浓度为0.01mol/L的NaOH溶液和摩尔浓度为0.005mol/L的HCl溶液，使溶液的pH值为3.2～3.4；

(6)将步骤(5)的混合溶液然后置于35℃水浴中在1000r/min条件下搅拌90～100分钟；

(7)按体积比为25∶1的比例将去离子水在1000r/min搅拌条件下滴加到步骤(6)中混合溶液中得到混合液M1，然后在1000r/min条件下搅拌4min；

(8)配制质量分数为7.5％的聚β羟基丁酸酯氯仿溶液；配制质量分数为7.5％的聚乙二醇氯仿溶液；按聚β羟基丁酸酯氯仿溶液与聚乙二醇氯仿溶液的体积比为5∶1的比例将二者充分混合得到混合溶液；

(9)按体积比为1∶4的比例将步骤(7)中混合液M1在1000r/min搅拌条件下滴加到步骤(8)中混合溶液中，然后在1000r/min条件下搅拌4min；

(10)按体积比为1∶1的比例将步骤(9)中的混合液在1000r/min搅拌条件下滴加到质量分数为3.5％的聚乙烯醇溶液，然后在1000r/min条件下搅拌4min；

(11)按体积比为2∶1的比例将质量分数为0.5％的聚乙烯醇溶液加入到步骤(10)中的混合液中，在1000r/min条件下搅拌7～8h，使溶剂充分挥发而引起聚合反应，在转速为6000r/min条件下进行离心分离，然后用去离子水洗涤3次，冷冻干燥得具有缓释氮功能的微球颗粒。

(12)将步骤(11)中的具有缓释氮功能的微球颗粒在石油烃降解菌培养液中培养24h，将石油烃降解菌吸附固定在微球颗粒上，其中石油烃降解菌培养液的含菌量为5×10¹⁰CFU/ml，培养液的组成为：NH₄NO₃:2.0g·L^-1，NaCl:10.5g/L，KH₂PO₄:2.5g·L^-1，FeCl₃:0.10g·L^-1，MgSO₄:3.5g·L^-1，CaCl₂·2H₂O:0.15g·L^-1；

(13)将步骤(12)中的微球颗粒取出风干，即可得到能够缓释氮和吸附-生物降解石油烃的微球颗粒。