[发明专利]一种竹子组培外植体获取方法

说明书

技术领域

本发明属于植物无性繁殖技术领域，涉及一种竹子栽培外植体的获取方法。

背景技术

竹类植物是我国森林资源的重要组成部分，具有生长快、成材早、产量高、用途广等特点，同时具有良好的水源涵养和水土保持功能，是经济效益和生态效益具佳的植物。竹类植物很少开花，不易结实，所以基本不用种子育苗，而是采用无性繁殖的方法繁殖小苗。种子育苗主要有扦插繁殖和组织培养等方法。但是，扦插繁殖由于母竹利用率低，对原有竹林资源破坏较大，繁殖率低等缺陷，很难大批量生产育苗；而组培繁育对繁殖材料利用率高，对母竹成长影响极小，繁殖系数高，苗木整齐，可实现工厂化育苗，能满足种子生产的需要。

目前，几种主要竹子已成功利用组织培养快繁技术进行育苗和造林，所使用的外植体种类有种胚、节芽、枝条茎段等，其中枝条茎段是利用最多的外植体材料。获取优良的外植体，是竹子组织培养成功的基础。但是，直接从现有的老竹丛中采集枝条，存在操作不便、枝条质量参差不齐、枝条利用率低、灭菌困难和诱导成功率低，阻碍了竹子工厂化育苗的步伐。而在苗圃里营建采穗圃，有针对性和目的性地管理母竹，不但操作方便，还能很好地控制母竹生长，所得枝条质量好，灭菌容易，丛芽萌发能力强。目前采用该技术方案的相关专利和文献未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有竹子组培中获取外植体的不足，提供一种污染率低、诱导率高、成本低及操作简单的竹子组培外植体的获取方法。

本发明是这样是实现的：

一种竹子组培外植体获取方法，特征在于：通过在苗圃营建采穗圃，目标化、精细化管理采穗母竹，控制枝条选择范围，以获取优良的竹子组培外植体，其获取方法包括母竹种植、母竹管理、枝条选择和修剪、茎段消毒和修剪等工序，其具体步骤如下：

（1）母竹种植：于2～3月选择经过测定的优良竹丛分蔸种植于装有基质的容器中；

（2）母竹管理：定期施肥、修剪，视情况断根；

（3）枝条选择和修剪：从母竹上剪取半木质化枝条，剪去叶子，修剪成茎段；

（4）茎段消毒和修剪：先后使用洗洁精、自来水、酒精、升汞和无菌水清洗、消毒茎段，最后再次修剪茎段，获取组培无菌外植体。

以上所述的母竹种植方法是容器规格为口径50～80cm，高50～60cm，基质成分是表土10份、木糠3～5份、腐熟有机肥1～2份，种植株行距为0.7～1m×0.7～1.3m。

以上所述的母竹管理方法是8～10月把当年生的母竹于距离地面1.3～1.8m处截断，分别于3～4月和6～7月给每丛母竹埋施100～200g复合肥，6～8月和翌年2～3月剪除母竹上的老枝条，当新笋生长过于旺盛时，于2～3月沿容器四周松土断根1次。

以上所述的枝条选择方法是每年5～11月多次剪取枝条，选择直径0.1～0.4cm、具有3～6个节的枝条；茎段修剪方法是每3个节剪作一个茎段，剪口分别距离两端节0.1～0.3cm，剥除两端节的竹箨，保留中间节的竹箨。

以上所述的茎段消毒方法是将茎段置于容器中，先用0.2～0.5%的洗洁精溶液浸泡10～20min，用纱布反复擦拭茎段外表，用自来水冲洗15～30min，再用75～80%酒精溶液浸泡茎段15～20min，用无菌水清洗干净，最后用0.1～0.15%升汞溶液浸泡茎段8～15min，用无菌水清洗干净。

以上所述的茎段修剪方法是在超净工作台上，先把茎段两端剪除，只保留长度为1.5～3.0cm的中间带节芽部分，然后剥除竹箨。

本发明相对于现有的技术具有以下优点：

1.本发明的竹子组培外植体获取方法，将母竹种植在容器里，种植基质是半轻型基质，同时在8～10月把当年生的母竹进行截顶矮化，易于掌握水肥条件，很好地将母竹径粗控制在1～3cm，确保母竹下半部分具有节芽，方便剪取枝条。

2. 本发明的竹子组培外植体获取方法，每年修剪母竹节上老枝条2次，促进新枝生长，延长了枝条剪取时间，一年在5～11月能够多次剪取枝条，提高了枝条利用率。

3. 本发明的竹子组培外植体获取方法，每3个节作一茎段，剥去茎段两端节的竹箨，保留中间节的竹箨，即可防止消毒过程中污水和药液进入准备接种茎段的竹腔内，又能很好地保护准备接种茎段的节芽不受伤害。

4. 本发明的竹子组培外植体获取方法，在用洗洁精溶液浸泡时，用绵质纱布反复擦拭茎段外表面，可以彻底除掉茎段上的小刺毛，初步清除茎段表面的杂质和真菌。