[发明专利]一种永久性大脑中动脉闭塞模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物模型领域，具体地说，是一种在自发性高血压大鼠基础上进行永久性大脑中动脉闭塞模型制备的方法。

背景技术

脑卒中是急性起病的危重急症。全世界每年有1600万人因脑卒中而饱受痛苦，到2030年这一数字将增加2倍。缺血性脑卒中占脑卒中病人总数的60%-70%。因此缺血性脑卒中的基础和临床研究始终是重要的医学研究课题。

目前针对缺血性脑卒中药物治疗的动物实验很多，但试验有效的药物一旦转移到临床上很少能够观察到显著的疗效。分析原因可能与以往的动物实验多采用普通血压大鼠有关。众所周知高血压是脑血管病的最重要的危险因子。临床上大部分脑卒中病人有高血压所致的严重的脑血管动脉硬化。这种血管的病理改变影响病人脑血流自我调节能力，脑组织受损后的损伤程度，以及病人对治疗措施的反应。

中国专利文献CN101056535A公开了一种动脉闭塞性疾病动物模型的构建，通过特定部位的结扎或自体凝血块使动脉闭塞。中国专利文献CN101023864A公开了一种建立出血性脑梗死大鼠模型的方法，采用两步法建立出血性脑梗死动物模型，即梗塞模型和出血模型的结合，梗塞模型采用线栓法，出血模型采用尾动脉字体血注入法。但是关于一种更接近于临床的缺血性脑卒中动物模型目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种永久性大脑中动脉闭塞模型的制备方法。

本发明的再一的目的是，提供一种永久性大脑中动脉闭塞模型。

本发明的另一的目的是，提供一种永久性大脑中动脉闭塞模型的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种永久性大脑中动脉闭塞模型的制备方法，包括以下步骤：a、选用自发性高血压大鼠，b、线栓法建立永久性大脑中动脉闭塞模型。

所述的线栓法包括以下步骤：麻醉大鼠，颈部正中切口，分离CCA、ICA，ECA与伴行神经后，在ECA穿两根5-0号线备用；分离并结扎颈外动脉分支：甲状腺上动脉；结扎ECA远心端，近心端打一个活结备用；用动脉夹暂时夹闭CCA与ICA；在ECA两线结之间剪以斜行切口；将线栓圆头向上插入切口后系紧备用的活结防止出血；打开置于CCA与ICA的血管夹；在两线结之间离断ECA，将线栓退至ICA与ECA分叉口，然后折返ECA断端，使之与ICA成直线关系；沿血管走行小心将栓线送入ICA；微遇阻力时停止送线，测量从分叉口到线栓圆头端的距离，再次系紧ECA残端的活结防止出血；剪断外露的栓线，保留残端；分层缝合切口。

所述的线栓插入距离为18±0.5mm。

所述的大鼠体重220-270g。

所述的线栓的线身直径24nm，线头直径32nm。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种永久性大脑中动脉闭塞模型，根据以上所述的方法制备得到。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：所述的模型在缺血性脑卒中动物实验中的应用。

本发明优点在于：

1、线栓法与颅骨钻孔手术相比操作简单；

2、方案操作可行，重复性好，成功率高；

3、更加符合临床实际。

附图说明

图1. MCAO制作示意图，A：MCAO手术前颈部和大脑血管；B：MCAO手术后颈部和大脑的血管；ACA：大脑前动脉；BA：基底动脉；CCA：颈总动脉；ECA：颈外动脉；ICA：颈内动脉；MCA：大脑中动脉；PCA：大脑后动脉。

图2. 实验脑梗死程度与文献脑梗死程度比较图。

图3. 手术组与假手术组NeuN染色比较（Bar=50μm）。

具体实施方式

下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1

一、实验方法

1、实验动物

SPF级雄性自发性高血压大鼠，体重220~270g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，大鼠饲养于22～25℃的环境，12h 昼夜节律，自由进食与饮水。

2、主要仪器、显微器械及栓线

电热恒温培养箱：上海医学院生理教研室研制；

无创鼠尾动脉测量系统（BPmesure 1.0）：上海医学院生理教研室研制；

MCAO线栓：北京沙东生物技术有限公司。

3、线栓选取

选取北京沙东生物技术有限公司大鼠用2432型号（线身直径24nm;线头直径32nm）的线栓。 

4、术前血压测量