[发明专利]一种油橄榄叶中抗糖尿病活性部位的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗糖尿病活性部位，具体涉及以油橄榄叶为原料提取的抗糖尿病活性部位及其提取方法。

背景技术

糖尿病（diabetes）是严重危害人类健康的几大疾病之一，目前全世界有超过一亿糖尿病人，其中我国接近二千万，并有逐年增加的趋势。病死率仅次于恶性肿瘤及心血管病，是危及人类生命的第三大疾病。

目前对于胰岛素依赖型糖尿病的治疗，多采用注射胰岛素，但胰岛素久用产生抗体，生物活性降低，剂量增加，产生高胰岛素血症，促使微血管病变发生与发展。而对于非胰岛素依赖型糖尿病的治疗，西药降糖药为数不少。根据其化学特性主要分为两大类，即磺脲类，如优降糖，美吡达，甲磺吡脲，克糖利等，但此类药久用损害肝脏、肾脏及血细胞，与磺胺药交叉过敏，后期产生继发性失效；双胍类，如降糖灵，降糖片等，但此类药疗效低、副作用大，久用产生高乳酸血症。虽然也有一些治疗糖尿病的中成药，但由于效果并不十分明显，患者仍然主要依靠西药治疗。从中药中寻找高效低毒，降糖物质基础明确的新药一直是中外药学工作者关注的热点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种油橄榄叶中抗糖尿病活性部位的提取方法。

一种油橄榄叶中抗糖尿病活性部位的提取方法，其特征在于该方法依次步骤为： 

A将干燥油橄榄叶用溶剂提取，过滤，合并滤液，得到油橄榄叶提取液；

B将油橄榄叶提液经浓缩干燥后，得油橄榄叶抗糖尿病提取物活性部位，低温、避光保存。

上述方法中，用溶剂进行提取时，所用溶剂为水、乙醇、乙酸乙酯中的一种；或着水、乙醇、乙酸乙酯中任意几种的混合溶液。

上述方法中，用溶剂进行提取时，提取溶剂与油橄榄叶的比例为1-30 mL: l g。

    上述方法中，可以提取一次，也可以提取多次。

试验例1：α-糖苷酶抑制实验

1.样品对照管溶液配制：分别精密称取提取物活性部位，用含0.5%DMSO的水超声溶解，配制成不同浓度（30、40、50、60、70、80、90、100 mg·L^-1)的待测样品溶液，备用。

2. α-糖苷酶抑制实验方法：分别精密量取由0.2 mol·L^-1，pH7.0磷酸缓冲液配制的α-淀粉酶溶液（5 mg·L^-1）100 μL，待测样品溶液150 μL，置入具塞刻度试管中，混匀，放在37℃水浴中反应10 min后，再加入0.04%可溶性淀粉水溶液500 μL，继续在37℃水浴反应15 min后，将具塞刻度试管从水浴中取出，往其中加入1 moL·L^-1盐酸溶液300 μL终止反应，再加入0.01 moL·L^-1碘液200 μL与反应液混合显色后，用水稀释反应液最终体积至4 mL，其它待测溶液的配制过程见表1。

表1. 待测溶液的配制

分别取制备好的待测溶液a-f，在660 nm处测定其吸光度值(A)，按公式1和2计算样品和阳性对照物的α-淀粉酶活性抑制率，结果见表2。

2.油橄榄叶提取物对α-淀粉酶抑制效果

由表2可以看出，在提取物活性部位浓度为30-100 mg·mL^-1的范围内，对α-淀粉酶均表现出一定的抑制作用，计算提取物活性部位的IC₅₀值为249.02 mg·mL^-1，且抑制效果与浓度呈现良好的量效关系。

表2.油橄榄叶提取物活性部位对α-淀粉酶活性的抑制作用（n=3）

试验例2：非酶糖基化抑制实验

1.样品对照管溶液配制：精密称取油橄榄叶提取物活性部位，用含0.5%DMSO的水超声溶解，配制成不同浓度（30、40、50、60、70、80、90、100 mg·L^-1)的待测样品溶液，备用。