[发明专利]一种大白菜eIF(iso)4E.c位点转座子插入突变体

权利要求书

1.一种大白菜eIF(iso)4E.c位点转座子插入突变体，其特征在于：与野生型位点检测相关的标记命名为ASM-4E.c-W，片段大小1216bp，如SEQ ID No.1所示；对应的突变位点检测相关的标记命名为ASM-4e.c-I，片段大小4419bp，如SEQ ID No.2所示。

2.权利要求1所述的大白菜eIF(iso)4E.c位点转座子插入突变体的引物，其特征在于：引物序列如下：

正向引物PF1：5'-CGAAGAAGAATATGGCGA-3'；

反向引物PR1：5'–AAAAAACCGCTCAAACAAT-3'；如SEQ ID NO.3、4所示。

3.权利要求1所述的大白菜eIF(iso)4E.c位点转座子插入突变体作为特异性分子标记在鉴别大白菜eIF(iso)4E.c位点的基因型中的应用。

4.权利要求2所述的引物在鉴别大白菜eIF(iso)4E.c位点的基因型中的应用。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于：具体应用方式为：利用引物对待测个体的基因组DNA进行PCR扩增，检测扩增片段大小，如果扩增出1216bp的条带，则为野生型；扩出4419bp的条带则为突变型；如果同时扩出两条带，则为杂合型。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述PCR扩增具体为：在20μl反应体系中，包含1×LA taq buffer；20ng的基因组DNA；0.4μM正反向引物；0.25mM dNTPmix；1个单位的LAtaq；

PCR循环条件：95℃预变性5分钟；接着是95℃变性30秒，57.5℃退火30秒，72℃延伸5分钟，35-38个循环，最后72℃延伸10分钟。