[发明专利]一种茯苓多糖的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于多糖提取技术领域，具体涉及一种茯苓多糖的提取方法。

背景技术

茯苓(Poria coccus wolf)为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，是常用的传统中药，具有渗湿、健脾、利尿等功能。茯苓多糖(pachyman)具有抑制肿瘤生长，调节机体免疫等功能。近年来茯苓多糖的提取一般用热水浸提法、碱液浸提法、酸液浸提法等先得到茯苓多糖的粗品再通过纯化工艺得到茯苓多糖的精品。热水浸提法时间长且多糖提取率低，而酸碱液浸提法浸提程序较繁琐，浸提条件较剧烈，极易破坏多糖的立体结构，使其生物活性受到限制。以上传统的提取方法中，提取时间较长，工艺条件难以控制使得茯苓多糖立体结构易破坏、生物活性较低，提取效果不好。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种茯苓多糖的提取方法，能显著提高茯苓多糖的浸出率，不仅提取的茯苓多糖立体结构不易被破坏、生物活性高，而且具有浸提时间缩短，提取条件温和的优点。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

采用酶解和热水浸提法提取茯苓多糖，包括以下步骤：

（1）将茯苓粉碎后加水浸泡30min；

（2）向所述茯苓中加入复合酶；

（3）将所述反应液中和后加水升温至80℃，浸提反应90min；

（4）采用乙醇醇沉所述反应液，然后采用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤所述醇沉后的反应液，即得多糖粗品；

（5）纯化茯苓多糖。

所述复合酶先加水在40℃时活化反应10min后再加入所述茯苓中。

所述复合酶加入茯苓中后保持反应温度为48℃，pH为5，浸泡反应90min。

所述茯苓多糖的纯化包括以下步骤：

（1）    通过去蛋白质大孔树脂吸附纯化所述茯苓多糖；

（2）    将所述吸附纯化后的茯苓多糖洗脱液浓缩后透析；

（3）    冷冻干燥所述透析液的浓缩物。

本发明通过设计一系列实验，对影响酶解过程的因素进行分析，发现影响酶法提取茯苓多糖的因素主要有：酶加入量、酶解pH值、酶解温度、酶解时间、固液比等。本发明设计一系列实验就酶解过程中不同因素对茯苓多糖提取率的影响做了比较。同时，通过对影响热水浸提过程的因素设计实验得出，酶解反应和80℃热水浸提两个阶段都很重要；对其中酶解后再用热水浸提的过程中，主要评价了浸提时间、温度、固液比对茯苓多糖浸出率的影响。通过一系列实验的设计得出最佳反应时间和工艺条件，从而优化了工艺方法。

本发明采用复合酶和热水浸提法提取茯苓多糖，使提取时间缩短，多糖提取率提高，同时能保持茯苓多糖的生物活性，适合于茯苓多糖在医药和保健品方面的开发。

有益效果：本发明通过提供一种茯苓多糖的提取方法，能显著提高茯苓多糖的浸出率，不仅提取的茯苓多糖立体结构不易被破坏、生物活性高，而且具有浸提时间缩短，提取条件温和的优点，相对于现有技术，具有优异的效果。

附图说明

图1酶加入量对茯苓多糖浸出率的影响。

图2酶解时间对茯苓多糖浸出率的影响。

图3酶解温度对茯苓多糖浸出率的影响。

图4酶解液pH对茯苓多糖浸出率的影响。

图5固液比对茯苓多糖浸出率的影响。

图6酶解后热水浸提温度的影响。

图7酶解后热水浸提时间的影响。

图8酶解后热水浸提加水量的影响。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，本发明在以本发明技术方案为前提下进行实施，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

本发明结合附图，说明如下。

从图1中可以看出，随着酶加入量的增大，多糖的浸出率也在上升，当酶的加入量达到1%时，浸出率达到最大值，酶加入量过大，会导致提出的多糖的降解，反而使多糖浸出率降低。所以确定最佳酶加入量为1%。

从图2中可以看出，随着酶解时间的增长多糖的浸出率不断上升，当达到90min时，浸出率已接近最大值，再延长酶解时间，提取率变化不大，而且酶解时间过长会导致多糖降解、杂质大量溶出。所以酶解时间定为90min。

从图3中可以看出，48℃是最佳酶解温度，有利于酶效的充分发挥。

从图4中可以看出，酶解液最佳pH值为5.0，此时酶解可以达到最佳效果。