[发明专利]一种植物源性食品中喹螨醚残留量测定的高效液相色谱法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种农药残留分析方法，具体涉及一种植物源性食品中喹螨醚残留量测定的高效液相色谱法。

背景技术：

喹螨醚属喹唑啉类杀螨剂，是以邻氨基苯甲酸为原料，制得4-羟基喹唑啉，再与三氯氧磷反应，得到的含4-氯喹唑啉盐酸盐的混合物，然后4-特丁基苯乙醇回流反应，得到4-(2-(4-特丁基苯基)乙氧基)喹唑啉盐酸盐，中和后即得本品。喹螨醚主要用于扁桃(杏仁)、苹果、柑橘、棉花、葡萄和观赏植物上，可有效地防治真叶螨、全爪螨和红叶螨以及紫红短须螨。该化合物亦具有杀菌活性。中国、欧盟、日本和美国等暂未制定喹螨醚的最大残留限量(MRL)，印度规定喹螨醚在茶叶中的最大残留限量为3mg/kg，韩国规定其在苹果、嫩枝、茄子、葡萄、中国柑橘、梨、紫苏叶和西瓜中的最大残留限量分别为0.1，0.1，0.2，0.5，0.7，0.3，3和0.05mg/kg。

①Food and Chemical Toxicology，2004，42，423-428，公开了用二氯甲烷萃取茶叶和茶汤中的喹螨醚，弗罗里硅土柱层析净化，高效液相色谱仪测定，采用乙腈-水＝80∶20为流动相。

②《农药科学与管理，2011，32(8)，41-43》公开了用甲醇∶0.05％磷酸溶液＝85∶15为流动相分离，在220nm处检测紫外吸收进行喹螨醚定量分析。

③Journal of Chromatography A，2008，1208，16-24，公开了采用中空纤维-液相微萃取技术分离含酒精饮料中的50种农药(含喹螨醚)，用超高效液相色谱-串联质谱仪测定。

④Journal of Chromatography A，2004，1036，161-169，公开了用氢氧化钠调节pH值，用乙酸乙酯-环己烷提取苹果酱、浓缩柠檬汁、番茄酱中的24种新型农药残留(含喹螨醚)，用液相色谱-串联质谱仪测定。

但经过本发明人系统的研究，结果表明上述专利或论文所确定的主要技术条件在实际的生产应用中存在有缺陷：

(1)上述方法所选用的流动相甲醇-0.05％磷酸溶液＝85∶15在220nm波长处不易平衡，改用甲醇-水＝85∶15时，峰形、分离度、拖尾因子和对称性均能满足要求。

(2)上述方法采用二氯甲烷作为提取溶剂，毒性较大，且提取溶剂用量较大，环境污染严重，采用乙腈作为提取溶剂，提取效率较高，毒性较二氯甲烷小。

(3)上述方法采用正己烷-乙酸乙酯＝99∶1(V/V)作为洗脱溶剂，喹螨醚不能被洗脱。

为寻求对于植物源性食品中喹螨醚更科学合理，更具有实用性的残留分析方法，本发明人经过系统的对比研究，提供了一种不同于上述论文或标准所公布的，可用于测定植物源性食品中喹螨醚残留的HPLC法。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于，克服上述现有技术的不足，提供一种简便快速，且成本低的植物源性食品中喹螨醚残留量的液相色谱测定方法。

本发明为实现上述目的，所采用的技术方案是：

本发明的一种植物源性食品中喹螨醚残留量测定的高效液相色谱法，包括以下步骤：

1.样品提取：

称取已制备好的水果、蔬菜或粮食样品5.0-10.0g于50mL具盖离心管中。粮食类或含水量较少的样品加入3-5mL水，然后加入15-30mL乙腈，其他样品直接加入15-30mL乙腈，震荡提取20-60min，加入3-5g氯化钠涡旋混匀后，5000-10000rpm离心5-15min，移取一定体积的上清液至鸡心瓶中，旋转蒸发至近干，用正己烷溶解残渣，待净化；

2.固相萃取柱净化

将上步溶解液转移至弗罗里硅土固相萃取柱，上样后先用10-20mL正己烷淋洗，弃去流出液，再用10-30mL正己烷+乙酸乙酯(9+1)洗脱，收集洗脱液于鸡心瓶中，旋转蒸发至干，残留物用甲醇溶解并定容，供高效液相色谱测定；

3.色谱测定

称取喹螨醚标准品，用甲醇溶解并定容后作为储备液，然后进一步用甲醇稀释为具有浓度梯度的标准使用液；

利用液相色谱仪对试样进行检测，外标法定量；

作为优选，高效液相色谱分析条件为：

a)色谱柱：以碳十八烷基键合硅胶为填充剂；

b)流动相：甲醇+水＝80+20至90+10(V/V)；

c)柱温：35℃；

d)流速：1mL/min；

e)进样量：20μL；

f)波长：220nm；