[发明专利]用于HPV检测的阵列式多重微流体恒温扩增芯片

说明书

技术领域

本发明涉及一种多重核酸恒温扩增技术，尤其涉及一种阵列式多重微流体恒温扩增芯片。 

背景技术

人乳头瘤病毒HPV是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属，是球形DNA病毒。分高危险型和低危型，低危型HPV如HPV-6，11，13，32，34，40，42，43，44，53，54等与感染生殖器、肛门、口咽部、食道黏膜,特别是HPV6, 11，发生率最为广泛。高危型人乳头瘤病毒的持续感染是引起宫颈癌的主要原因，而其中人乳头瘤病毒16型、18型是与宫颈癌发生最密切、致病风险最高的2种高危型人乳头瘤病毒，至少占宫颈癌的40%以上。及时快速地区分不同类型的重要HPV对于疾病的预防和治疗具有至关重要的作用，无论对个人还是社会都具有重大的意义。 

环介导等温核酸扩增（Loop-mediated isothermal amplification， LAMP）最早由日本科学家发明，该技术具有灵敏度高、特异性好、反应速度快、反应结果可以直接肉眼判定等优点，经过近10年的学术研究，现以各种检测试剂盒的形式进入市场。但是LAMP反应的“等温模式”和其复杂的核酸探针使其很难在同一体系中实现一个样品中多种目标物的同时检测，即多重检测。微流控技术是在微米尺度结构中操控纳升至皮升体积流体的技术与科学，在该尺度下大幅度增强的层流效应、表面张力效应、毛细效应、热传导效应及扩散效应，使许多物理和化学过程发生了质的变化，是当前正在急速发展的高新技术和科技前沿领域之一，是未来生命科学、化学与信息科学发展的重要技术平台，该技术的应用可以实现LAMP反应的多重检测模式。 

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种用于HPV检测的阵列式多重微流体恒温扩增芯片。 

本发明的目的是这样实现的：一种用于高危HPV检测的阵列式多重微流体恒温扩增芯片，它包括毛细管通道、连接管道、加样孔、若干扩增池和若干探针注入孔，所述加样孔与毛细管通道相通，所有扩增池的一端均通过连接管道与毛细管通道连通，另一端各与一探针注入孔连通；其中，一个扩增池中置有阳性探针，该阳性探针具有SEQ ID NO.25- SEQ ID NO.28所示的DNA序列，另一个扩增池中置有阴性探针，所述阴性探针为水，所述阳性探针和阴性探针用以提高检测结果的可信度；其余扩增池1中分别包被上针对目标核酸片段的特异性探针；所述针对目标核酸片段的特异性探针由针对HPV-6，11的具有SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.12所示的DNA序列的探针、针对HPV-16的具有SEQ ID NO.13-SEQ ID NO.18所示的DNA序列的探针和针对HPV-18的具有SEQ ID NO.19- SEQ ID NO.24所示的DNA序列的探针中的一种或多种组成。 

进一步地，所述连接管道呈四棱台状，横截面大的一端与扩增池相连，横截面小的一端与毛细管通道相连，使微流体从毛细管通道平稳均匀的流入扩增池，且不产生气泡。所述扩增池空间尺寸根据其体积需求，其长度可以随需求任意改变，宽度和深度的空间尺寸一般￡1mm；毛细管通道的宽度和深度一般￡0.3mm都可以。 

本发明的有益效果是，本发明阵列式多重微流体恒温扩增芯片可应用于快速合并检测HPV6型和HPV11型的核酸，分型检测HPV16型和HPV18型的核酸。 

附图说明

图1是阵列式多重微流体恒温扩增芯片的结构示意图； 

图中，扩增池1、连接管道2、毛细管通道3、加样孔4、探针注入孔5。

具体实施方式

如图1所示，本发明阵列式多重微流体恒温扩增芯片包括毛细管通道3、加样孔4、若干扩增池1和若干探针注入孔5，加样孔4与毛细管通道3相通，所有扩增池1的一端均通过连接管道2与毛细管通道3连通，另一端各与一探针注入孔5连通。