[发明专利]一种南极大磷虾粉营养强化轮虫的方法

说明书

技术领域

本发明属于水产生物饵料营养强化技术，特别是用南极大磷虾粉营养强化轮虫的方法。

背景技术

褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis）（以下简称轮虫）是一种小型的多细胞水生动物，广泛分布于温热带地区的半咸水和海水水域，是鱼类、甲壳类的重要的天然生物饵料，一直在海水仔稚鱼培育、虾蟹育苗生产及名贵观赏水族动物的养殖中被广泛应用。目前，在轮虫的大规模生产性培养中，主要以酵母作为适合饵料，而以酵母为饵料所培养的轮虫体内缺乏ω3-系列多不饱和脂肪酸（ω3-PUFA），尤其是二十二碳六烯酸（DHA）和二十碳五烯酸（EPA）。水产动物营养学的研究结果已表明：ω3-PUFA是水产动物幼体所必需的营养物质，也是幼体所需能量的主要来源，其组成和含量直接影响到幼体的正常生长发育和存活。特别是ω3-PUFA中的DHA和EPA，有着维持仔稚鱼的细胞膜正常生理功能和神经发育的重要作用，是维持海洋鱼类正常生长和发育的必需脂肪酸。鉴于轮虫及其营养价值对于水产动物幼体的重要性，在投喂幼体之前，亟需对轮虫进行营养强化。

目前，轮虫主要采用微藻、油脂型强化剂和微囊强化剂等营养强化方法。微藻强化是最传统的轮虫营养强化方式，但微藻生产易受培养的环境条件和培养技术等因素的影响，而且有些藻类比如小球藻(Chlorella vulgaris)本身也缺乏DHA，因此微藻强化也存在较多的弊端。油脂型强化剂（如精制鱼油、乳化型鱼油、豆油等）和微囊强化剂（如50DE等）均能起到营养强化作用，但由于油脂性强化剂易氧化，且易污染水质，导致轮虫成活率降低，而微囊化处理工艺复杂且成本昂贵，鉴于这些原因，这些产品在实践应用上受到诸多限制。因此，新型营养强化材料的开发利用仍是一项亟待解决的研究课题。

南极大磷虾（Euphausia superba）隶属节肢动物门，甲壳纲，磷虾目。南极大磷虾粉富含蛋白质、氨基酸、脂肪酸、维生素等营养物质，但是，目前未见有关南极大磷虾粉营养强化轮虫的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用南极大磷虾粉营养强化轮虫的方法，通过使用南极大磷虾粉提高轮虫体内ω3-PUFA，尤其是DHA和EPA含量，提高ω6系列多不饱和脂肪酸（ω6-PUFA）中的花生四烯酸（二十碳四烯酸，ARA）的含量，使强化后的轮虫营养更全面均衡，可满足鱼类、甲壳类幼体对轮虫的营养需求。

本发明的技术方案采用南极大磷虾粉作为强化轮虫的营养材料，其特征是先使用Pulverisette 16型交叉搅拌研磨机将南极大磷虾粉进行超微粉碎，使南极大磷虾粉的粒径＜120μm，然后按100g经超微粉碎的南极大磷虾粉加入到600mL纯净水的配比，并用均质器搅拌，均质器的转速为15500-22000rpm，搅拌时间为2min，然后按相同方法反复搅拌3次，再采用超声波破碎溶解20min，使南极大磷虾粉的粒径＜25μm，制得南极大磷虾粉母液，并用纯净水将南极大磷虾粉母液总体积补足至1L后，置于4℃冰箱内储存备用；强化轮虫的步骤是将轮虫收集至盛装清洁海水的桶中，水温(25±0.5)℃，盐度28±1，连续充气，自然光照，轮虫密度为(550±10)inds/mL，桶内施加上述制备的南极大磷虾粉母液，所用南极大磷虾粉的终浓度为50mg/L，即1L海水中，施加南极大磷虾粉的量为50mg，强化时间6～18h。

本发明的突出特点是用南极大磷虾粉营养强化轮虫，并具有以下显著技术效果：一是按50mg/L的浓度使用南极大磷虾粉强化轮虫后，轮虫体内的DHA、EPA和ω3-PUFA的含量显著高于未强化轮虫（见附表1），尤其是ω3-PUFA的含量几乎是未强化轮虫的10倍以上；二是南极大磷虾粉不仅可提高轮虫体内DHA、EPA和ω3-PUFA的含量，而且也可提高ω6-PUFA中的花生四烯酸（二十碳四烯酸，ARA）的含量，按50mg/L的浓度使用南极大磷虾粉强化轮虫后，轮虫体内的ARA含量几乎是未强化轮虫的1.7倍（见附表1）；三是南极大磷虾粉强化轮虫的浓度以50mg/L为优，强化时间以12和18h为最适宜；四是南极大磷虾粉营养价值高且资源丰富，成本尚不及50DE、乳化型鱼油或油脂型鱼油成本的1/3，而且不易污染水质，也不影响轮虫成活率，强化过程操作简单，便于使用。

具体实施方式