[发明专利]一种枯草芽孢杆菌BC-198、及其富硒菌剂与应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种枯草芽孢杆菌BC-198及其其富硒菌剂与应用。

背景技术

硒是人类和动物必须的微量元素，有防癌和抗癌作用，长期缺硒，可引起多种疾病，是引起克山病的病因之一。现在人们认识到补硒必要性，通过食品补硒被认为最安全，最方便的手段。

同世界大多数国家一样，我国也是缺硒地区。我国缺硒省市达20多个，土壤中硒含量约0.03-0.1mg/kg，向土壤补硒是获得富硒农产品（食品）的一种有效办法。多年来，人们以富硒矿石、富硒煤矸石等原料，经粉碎、碱处理得到少部分（20%）可溶性无机硒，与氮、磷、钾、铜、锌、铁、镁、硼等无机盐或有机质复混成富硒肥料，或把硒制备成硒酸钠、亚硒酸钠，并以其溶液再与无机或有机肥料混配成富硒肥料，喷施到作物叶片或直接施到土壤中，这些富硒肥料虽然可以生产富硒农产品和富硒食品，但对肥料中无机硒作物利用率仅10%-15%，仍很低，施用有机硒可能是提高作物对硒利用率的途径。

农用微生物菌剂是一类有别于无机复合肥料、有机肥料的功能性微生物肥料。利用有益微生物转化硒，把无机硒转化成有机硒，以提高农作物对硒利用率，提高农产品含硒量。目前富硒微生物包括：富硒酵母、富硒食用菌、光合细菌等。专利CN200710010871发明的一种富硒联合固氮菌剂，在制备菌剂中加入可溶性硒，利用固氮菌对无机硒进行转化，但其制剂中只采用固氮菌，仅具有单一固氮生理功能的富硒微生物肥料。专利CN 102618469A，发明名称：一种荚膜红细菌及其应用，公开了一种荚膜红细菌AYGHJ-16，属光合细菌，利用光能对物质进行代谢，促进无机硒的转化和吸收，并有固氮和固碳作用。专利100512666C，发明名称：一种含硒微生物饲料添加剂及其制备方法，公开了利用微生物活菌为红假单孢菌、纳豆菌芽孢杆菌和酵母菌进行液体发酵、固体发酵，实现无机硒的微生物转化。与本发明相比，目前的菌剂对硒的转化或采用单一菌株或者同类菌株，对硒的转化以及植物对硒的利用仍比较低。而且推广使用的功能性微生物肥料如固氮、解钾、解磷、催腐、促生长、抗病等肥料大多是功能单一的普通微生物菌剂。

发明内容

本发明目的是提供一株枯草芽孢杆菌BC-198及其应用。

本发明另一目的是提供含有上述枯草芽孢杆菌BC-198的菌剂。

本发明再一目的是提供一种有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌AS1.212的复合菌剂。

本发明又一目的是提供所述复合菌剂的制备方法。

本发明提供的枯草芽孢杆菌Bacillus Subitilis BC-198，已于2012年8月30日保藏于中国典型培养物保藏中心（简称CCTCC；地址：中国武汉，武汉大学；邮编：430072），保藏编号CCTCCNo.M2012321。

本发明还提供含有所述枯草芽孢杆菌BC-198的菌剂。

本发明进一步提供一种复合菌剂，其有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌AS1.212。所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为10-25亿/ml，所述褐球固氮菌AS1.212的活菌数为10-25亿/ml。

优选地，所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为15-19亿/ml，所述褐球固氮菌AS1.212的活菌数为15-19亿/ml。

本发明所述复合菌剂还含有防腐剂、保护剂；

其中，所述防腐剂为苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钠盐、丙酸及其钠盐中的一种或几种；所述保护剂为多羟基聚合物，其中所述多羟基聚合物为海藻酸及其钠盐、聚谷氨酸及其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐中的一种或几种。

本发明还提供所述复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：

1）制备枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌AS1.212种子液；

2）枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌AS1.212种子液发酵培养，制备发酵液。

其中，所述种子培养条件为：种子培养基在500毫升三角瓶装100-130毫升培养基，28-35℃恒温振荡培养12-16小时得种子液。

培养枯草芽孢杆菌BC-198的种子培养基组成：含硒溶液100毫升中加入葡萄糖0.5%、淀粉0.3%、蛋白胨0.6%、酵母膏0.25%、氯化钠0.4%、磷酸氢二钾0.1%、PH7.2；

褐球固氮菌AS1.212的种子培养基组成：含硒溶液100毫升中加入0.3%葡萄糖、0.8%蔗糖、0.2%蛋白胨、0.6%酵母膏、0.4%氯化钠，硝酸钾0.2%、PH7.4。