[发明专利]一种修复硝基甲苯污染土壤的菌剂及使用方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种修复硝基甲苯污染土壤的菌剂及其使用方法。

背景技术

TNT(2，4，6三硝基甲苯)是目前产量最高的生产炸药，近年来弹药车间中TNT的制造、加工和包装已经导致土壤高浓缩的污染，最终将导致地下水的污染。人长期暴露于硝基甲苯会增加患贫血症和肝功能不正常的机会。注射了或吸入三硝基甲苯的动物亦发现会影响血液和肝脏、脾脏发大和其他有关免疫系统的坏影响。亦有证据证明了TNT对男性的生殖功能有不良影响，而TNT也被列为一种可能致癌物。目前，该类污染物处理难度较大。

现有技术中对硝基甲苯污染处理的方式主要有：物理方法：吸附法和萃取法；化学法：浓缩焚烧法、紫外照射法、臭氧及组合臭氧氧化法等；然而，物理方法、化学方法处理三硝基甲苯废水，操作复杂，费用贵，治理不彻底，效果令人不堪满意。生物法是利用生物的新陈代谢作用对废水中的污染物进行转化，使之无害化的处理方式。硝基甲苯类化合物降解菌对硝基甲苯的彻底降解是十分必需的。许多化工厂已经应用降解性微生物处理硝基甲苯，并且已经取得了显著的效果。但是还不能完全满足实际的需要，因此，开发一种建设投资少、运行成本低、处理效率好的修复硝基甲苯污染土壤的方法迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于修复硝基甲苯污染土壤的菌剂和利用高效复合菌剂处理污染土壤的方法。

本发明的高效复合微生物菌剂，各菌种之间合理配伍，共生协调，互不拮抗，其制备方法简便，方法易行，其操作简便，利于生产。

本发明是采用如下技术方案实现的

一种修复硝基甲苯污染土壤的菌剂，该菌剂的活性成分包括下列重量百分比的原料：

亚硝化菌30％，枯草芽孢杆菌15％，粪产碱杆菌10％，铜绿假单孢菌10％，酿酒酵母10％，红球菌10％，巨大芽孢杆菌8％，黑曲霉7％。

上述菌剂中：

所述亚硝化菌优选为亚硝化菌(Nitrosomonas europaea)CCTCC No：M 2010002(CN101955885公开使用)；

所述枯草芽孢杆菌优选为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC No：0954(CN1554744公开使用)；

所述粪产碱杆菌优选为粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)ATCC 31555(例如参见文献Structural studies of an extracellular polysaccharide(S-130)elaborated by AlcaligenesATCC31555，Carbohydrate Research，1986)；

所述铜绿假单孢菌优选为铜绿假单孢菌(Pseudomonas aeruginosa)ATCC15442(例如参见文献Adaptation of Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442 to didecyldimethylammonium bromide induces changes in membrane fatty acid composition and in resistance of cells，Journal of Applied Microbiology，2001)；所述酿酒酵母优选为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CCTCC No：M 208110(CN101434911公开使用)；

所述红球菌优选为红球菌(Rhodococcus rhodochrous)ATCC 15906(例如参见Cloning and Characterization of Benzoate Catabolic Genes in the Gram-Positive Polychlorinated Biphenyl DegraderRhodococcus sp.Strain RHA1，J.Bacteriol.November 2001)；

所述巨大芽孢杆菌优选为巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium)CGMCC No：2267(CN101215532)；

所述黑曲霉优选为黑曲霉(Aspergillus nige)CCTCC No：M206034(CN1924000)。

本发明所述菌种均可以从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)以及美国模式培养物集存库(ATCC)、中国典型培养物保藏中心(CCTCC)购买得到。其中各菌种发酵液制备步骤是：