[发明专利]一种脂肪细胞分化代谢产物IGF-1抗体及包含该抗体的芯片以及应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及一种脂肪细胞分化代谢产物IGF-1抗体及包含该抗体的芯片以及应用。

背景技术

正常的脂肪代谢是机体生长发育的重要生理过程，其机制是复杂多向的机体整体变化，涉及到众多蛋白、细胞因子的上调或下调，而异常的脂肪代谢将导致肝脏损伤、高血压、内分泌失调、肥胖等疾病的发生，这些疾病的发病机理是一个漫长的发展过程，与个体的生活及饮食等习惯密不可分。目前中国的医疗水平和诊断技术还仅局限于传统的检测方法对单一疾病的诊断，而脂肪细胞分化标志物芯片的研制可将相关疾病进行横向比对，控制其并发症的发生，更加有效地指导临床用药，提高了诊疗水平，缩短了与国际同行之间的差距。随着中国老龄化进程的加快，以上疾病的发病率会逐年增多，此芯片的研制将在正常体检、疾病的预防和控制方面做出积极和重大的贡献。

本发明包括IGF-1在内的45种单克隆抗体与脂肪细胞分化代谢产物中的蛋白质的结合具有高度特异性，涵盖脂肪因子、疾病相关因子及细胞分化标志因子等。所制成的抗体芯片实现了对糖尿病、动脉粥样硬化、高血压、肥胖等疾病高通量检测技术平台，自主研发脂肪细胞分化代谢产物抗体芯片检测试剂盒（抗体芯片）完全是由中国人自主开发，应用这一芯片，可通过多种方式、多种渠道、多层面检测脂肪细胞分化代谢产物的效价和含量，将检测灵敏度由ug提高到ng级，从而达到更准确、更全面的效果，其检测结果即可定性也可定量。脂肪细胞分化代谢产物抗体芯片检测试剂盒（抗体芯片）对促进我国生物高技术前沿领域的发展具有重大鼓舞作用，对提升我国生物芯片技术、产品和市场的国际竞争力具有重大意义，此方法完全符合分子免疫学原理。目前国外几乎所有的主要制药公司都不同程度地采用了生物芯片技术来寻找药物靶标，查检药物的毒性或副作用及进行药物产品的定量和定性。用芯片技术进行大规模的药物筛选可以省略大量的动物试验，缩短药物筛选所用时间，从而带动创新药物的研究和开发。

发明内容

本发明的目的在于提供脂肪细胞分化代谢产物IGF-1的单克隆抗体及包含该抗体的芯片以及应用。

本发明的整体技术构思是：利用细胞融合、亚克隆及酶联免疫吸附实验进行特异性筛选技术，获得高效价、高特异性抗人脂肪细胞分化代谢产物单克隆抗体，由于此单抗效价高、特异性好，可直接应用于芯片的点样，结合CY3标记的补体C3抗体与被检产品建立了完整的检测系统检测检测45种脂肪分化代谢蛋白质含量的方法.此抗体芯片具有灵敏度高,特异性好、操作简单、高通量等优点,可用于临床和体检血清的监测和质控。

本发明提供的IGF-1单克隆抗体，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或其重链可变区由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过取代、缺失、或添加一个或几个氨基酸衍生的与SEQ ID NO.1的氨基酸序列至少有95%的一致性，轻链可变区由SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列经过取代、缺失、或添加一个或几个氨基酸衍生的与SEQ ID NO.2的氨基酸序列至少有95%的一致性且所述单克隆抗体具有与脂肪细胞分化代谢产物IGF-1特异性结合的特性。

作为优选，所述单克隆抗体包括单链抗体、双链抗体、嵌合抗体、人源化抗体、以及上述抗体的衍生物、功能等同物和同源物，也包括抗体片段和含有抗原结合结构域的任何多肽。

本发明所述“抗体”应该解释为涵盖具有所需特异性的结合结构域的任意特异性结合因子。因而，这个术语涵盖了与之同源的抗体片段、衍生物、人源化抗体以及抗体的功能等同物和同源物，也包括含有抗原结合结构域的任何多肽，无论是天然的还是合成产生的。抗体的实例是免疫球蛋白亚型(如IgG，IgE，IgM，IgD和IgA)及其亚型亚类；也可以是包含抗原结合结构域的片段如Fab、scFv、Fv、dAb、Fd；和双链抗体(diabodies)。融合至另一多肽的、包含抗原结合结构域的嵌合体分子或者等同物也包括在其中。嵌合抗体的克隆与表达在EP．A-0120694和EP．A．0125023中描述。

本发明所述单克隆抗体可以是，例如，单价的或是单链抗体、双链抗体、嵌合抗体、人源化抗体、以及上述抗体的衍生物、功能等同物和同源物，也包括抗体片段和含有抗原结合结构域的任何多肽。