[发明专利]一种提纯萨拉子酸的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然植物提取技术领域，涉及一种提纯萨拉子酸的方法。

背景技术

萨拉子酸（Salapermic acid），是一种三萜类化合物，呈无色棱晶状，主要存在于卫矛科植物中，如黄褐栲古那Kokoona ochracea(Elm.)Merrill茎皮、冬青叶美登木Maytenus ilicifolia Mart.根皮、雷公藤Tripterygium wilfordii Hook.f.根等。mp.328-330℃。分子式C₃₀H₄₈O₄，分子量472.71，结构式为：

。

目前对萨拉子酸的研究较少，药理研究表明，萨拉子酸具有抗艾滋病病毒的活性。彭晓云等从雷公藤根皮的乙醇提取物中分离得到包括萨拉子酸等多种化合物，不过雷公藤中萨拉子酸的含量较低，分离难、收率低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提纯萨拉子酸的方法。

一种提纯萨拉子酸的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）前处理：以美褐栲古那茎皮或冬青叶美登木根皮为原料，先将原料切成1cm左右段状，放入高速组织捣碎机，在15000rpm转速条件下保持5分钟后，按照料液比1:10（g/ml）的比例加入体积百分比浓度为85%的乙醇水溶液后，再加入0.3%的纤维素酶，在超声功率400W、37℃条件下酶解20分钟，低温干燥、粉碎过筛备用；

（2）超临界CO₂萃取：取过筛后的粉末加入到萃取釜中，操作条件为：萃取温度为43-57℃、萃取压力为22-39MPa，CO₂流速为16-28kg/h，按照料液比1:0.5-2.0（g/ml）比例加入乙酸乙酯作为夹带剂，萃取1-6h，收集萃取液，回收溶剂，真空干燥为粉末备用；

（3）大孔树脂柱层析分离：将真空干燥后粉末用水分散，通过AB-8大孔树脂柱，60-85%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩得萨拉子酸粗品；

（4）制备液相纯化：将粗品用制备型或半制备型液相色谱分离纯化，以甲醇-水混合溶液为流动相，甲醇体积百分比为85-95%，流速为5-50ml/min。

本发明采用超临界CO₂萃取、大孔树脂柱层析及制备液相色谱结合对天然植物进行分离纯化得到萨拉子酸，简便、快速，具有制备量大、产品含量高等优点。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明进行说明。

实施例1：

取美褐栲古那茎皮10kg切成1cm左右段状，放入高速组织捣碎机在15000rpm条件下保持5分钟后，按照料液比1:10（g/ml）的比例加入浓度为85%的乙醇水溶液100L后，再加入30g纤维素酶，在超声功率400W、37℃条件下酶解20分钟，低温干燥、粉碎过80目筛备用。

取过80目筛的粉末加入到超临界萃取釜中，萃取压力为32.3MPa，温度为55℃，萃取时间3h，CO₂流量为17kg/h，待提取罐内环境稳定后，加入料液比为1:1.2的乙酸乙酯作为夹带剂至夹带剂储罐中，调节解析斧温度为50℃，压力为7MPa，收集从解析釜出料口放出的萃取液。

将萃取液用水分散，通过AB-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至无色，再用70%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩得萨拉子酸粗品。

将萨拉子酸粗品用甲醇溶解配制成10mg/ml浓度的溶液，用制备型高效液相色谱仪纯化，制备柱以C18键合相为填料，以甲醇：水（93:7）为流动相，控制流动相流速为20ml/min，收集目标成分，旋转蒸发浓缩、真空冷冻干燥，得到萨拉子酸纯品546mg，含量为98.4%。

实施例2：

取美褐栲古那茎皮20kg切成1cm左右段状，放入高速组织捣碎机在15000rpm条件下保持5分钟后，按照料液比1:10（g/ml）的比例加入浓度为85%的乙醇水溶液100L后，再加入60g纤维素酶，在超声功率400W、37℃条件下酶解20分钟，低温干燥、粉碎过80目筛备用。

取过80目筛的粉末加入到超临界萃取釜中，萃取压力为25.7MPa，温度为46℃，萃取时间1h，CO₂流量为20kg/h，待提取罐内环境稳定后，加入料液比为1:0.5的乙酸乙酯作为夹带剂至夹带剂储罐中，调节解析斧温度为40℃，压力为8MPa，收集从解析釜出料口放出的萃取液。