[发明专利]一种鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物制药领域，涉及一种鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂及其制备方法。

背景技术

鸭坦布苏病毒病又名“鸭黄病毒病”、“鸭出血性卵巢炎”、“蛋鸭黄病毒病”和“新型黄病毒BYD引起的产蛋下降综合征”，它是2010年在中国浙江、福建、山东、广东等地首次发现的一种新鸭病，主要发生于蛋鸭、也发生于种鹅、肉鸭。蛋鸭发生此病时，临床表现为肢体站立不稳，行走困难，采食量下降，产蛋量骤然减少，减蛋幅度很大，5天内减蛋超过90%或者绝产，部分病鸭在数日内死亡，死亡率为5%～10%。剖检病变为卵巢发生出血、萎缩、卵泡破裂或萎缩等。此前，国内外未见类似疾病。2010年藤泽泱、曹贞贞、万春和等、2011年苏敬良等证明该病病原属于黄病毒科黄病毒属坦布苏病毒（Flaviviridae，Flavivirus，Duck Tembusu virus，DTMUV）。

2011年胡奇林等从广东省发生鸭坦布苏病毒病的蛋鸭中分离到1株鸭黄病毒JM株，对JM进行了鉴定，测定了JM株部分理化和生物学特性，并进行了动物回归试验等。

迄今为止，未见国内外有关鸭坦布苏病毒病免疫治疗方面的研究报道。因此，研制一种安全有效的鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂及其制备方法对我国养禽业的发展具有重大意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂，该免疫治疗制剂安全性好，治疗鸭坦布苏病毒病效果显著，安全可靠。

本发明的另一个目的在于提供上述鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一种鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂的制备方法，包括如下步骤：

a.蛋鸭开产前高免：对蛋鸭群开产前进行鸭坦布苏病毒病高强度免疫，当血清抗体琼扩效价达1:16为合格；

b.采集高免鸭蛋：采集经高免的蛋鸭群开产一个月内的初产蛋；

c.清洁消毒：将采集的高免鸭蛋清洁后，用质量百分比浓度为0.5%的新洁尔灭溶液浸泡消毒20min，晾干；

d.分离卵黄：在无菌条件下，打破蛋壳倒净蛋清，把蛋黄倒入消毒好的大烧杯内；

e.蛋黄匀浆：在无菌条件下，将蛋黄置于消毒好的捣碎机内，加入一定比例的生理盐水进行匀浆；

f.防腐抑菌：在无菌条件下，匀浆后的卵黄加入质量百分比浓度为0.01%的硫柳汞溶液或每毫升卵黄液加入青霉素、链霉素各一千单位进行防腐抑菌；

g.封装保存：在无菌条件下，将所述步骤e中经防腐抑菌的卵黄液摇匀后分装于消毒好的瓶中，冻结保存待用，保存温度为4-8℃或-20℃；

优选地，所述a步骤的具体操作为：

第一步：将鸭黄病毒毒株的生产用种毒进行大规模培养，收获病毒液；

第二步：将收获的病毒液灭活；灭活病毒液1倍膜浓缩。

第三步：将灭活浓缩后的病毒液加入佐剂中，乳化后即得免疫用抗原；

第四步：取免疫用抗原免疫蛋鸭，末次免疫后15～20天，随机采血分离血清，用琼脂扩散试验（AGP）测定抗DTMUV抗体效价，直到抗体效价达1:16合格为止；

进一步的，所述制得的鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂所含的琼扩抗体效价达1:16以上；所述第三步的具体操作为：将1体积份灭活后的病毒液加入2体积份的白油佐剂中，在高速匀浆机中以8000～12000r/min乳化，即得免疫用抗原。

优选地，所述生理盐水为与所述卵黄等体积质量浓度为0.85%的氯化钠溶液。

一种用所述制备方法制备得到的鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂，含有抗鸭坦布苏病毒高免卵黄抗体。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

1、本发明的鸭坦布苏病毒病免疫治疗制剂安全性好；

2、治疗效果好。对发病后2天的产蛋鸭用本发明的免疫治疗制剂注射2ml/只后，第2天后精神转好、食欲增加、运动逐渐转为正常，产蛋率开始升高；对发病后第5天的产蛋鸭注射本发明之免疫治疗制剂2ml/只，第2天后发病鸭精神好转、食欲增加、运动逐渐转为正常，第5天后产蛋率开始升高。证明该免疫治疗制剂可以用于临床上治疗鸭坦布苏病毒病，具有重大的经济和社会效益。

3、成本较低、适合工业化生产；本发明治愈每只产蛋鸭只需2ml免疫治疗制剂，成本约为0.2元；需要的设备比较简单，适合大规模生产。

具体实施方式

本发明所述的实例是对本发明的说明而不能限制本发明，在与本发明相当的含义和范围内的任何改变和调整，都应认为是在本发明的范围内。