[发明专利]一种用于检测抑郁症的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体是一种用于检测抑郁症的试剂盒。

背景技术

抑郁症是一种常见的心境障碍，其核心症状为情绪低落、思维迟缓、意志活动减退，还能出现睡眠障碍、反复自杀念头等。据WHO统计，目前全球约有1.21亿抑郁症患者，每年有850.000人的死亡与抑郁相关。抑郁症的遗传率约为 30%~40%，其中可能涉及到了多个遗传因素。同时，多种非遗传因素（应激、神经发育异常等）增大了抑郁症发病的复杂性，至今抑郁症发病机制仍未明确。临床上通过药物治疗、心理治疗或者物理治疗可使抑郁症状缓解。

目前，临床上对抑郁症只能通过临床症状结合抑郁量表来诊断，这种诊断方法难以在疾病潜伏期及其早期阶段明确检测抑郁症，其导致的不良后果是难以在疾病潜伏期及其早期阶段明确检测抑郁症。因此，现在急需发现一种新的、具有诊断意义的、能精确定量的抑郁症诊断材料及其使用方法，来对抑郁症进行潜伏期和早期阶段进行诊断，并为患者提供更好的治疗方法。

发明内容

本发明的目的是为检测抑郁症提供一种试剂盒，能精确定量地实现对抑郁症患者的诊断。

为实现上述目的本发明采用的技术方案是：一种用于检测抑郁症的试剂盒，包括一般诊断试剂盒中所使用的成分（即封闭液、酶标抗体、酶底物溶液、终止液、酶标板）和PEDF蛋白或者包含PEDF蛋白的蛋白质片段和与PEDF蛋白特异性结合的抗体（以下简称抗PEDF抗体），其中PEDF蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO1。

上述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。优选单克隆抗体。

权利要1所述PEDF蛋白或包含PEDF蛋白的蛋白质片段或与PEDF蛋白特异性结合的抗体在制备检测抑郁症的试剂盒中的应用，其中，正常、精神分裂症、抑郁症及双向情感障碍血清中PEDF蛋白的平均值分别为2918.9ug/mL、3037.8ug/mL、1624.8ug/mL、2838ug/mL。

本发明使用蛋白质组学方法分析了在抑郁症中显示特异变化的蛋白质群。通过分析抑郁症患者血浆、精神分裂症、双向情感障碍与正常血浆中的蛋白质数量变化和蛋白质类型发现了下列结果。第一，选择正常血浆作为对照组，通过二维凝胶分离和图像分析，在由抑郁症患者的血浆中分离显示性质和数量差异的蛋白质群，使用MALDI-TOF分析仪鉴定蛋白质群，证明了其中观察并鉴定变化的蛋白质是PEDF。第二，在以正常的血液作为正常对照组、以精神分裂症、双向情感障碍的血液作为疾病对照组时，观察到在抑郁血浆中PEDF的表达是降低的，在精神分裂症血浆中表达是增高的。第三，在检查了血液中的靶蛋白变化之后，使用适当的免疫学方法制备了诊断抑郁症的试剂盒，选择了用于测量蛋白质存在值的简单、灵敏、且精确的方法。其中，当患者血浆PEDF浓度低于2485ug/ml时可诊断为抑郁症，可以对抑郁症患者进行诊断。

附图说明

图1表示将要应用于蛋白质组学分析的血浆的预处理过程；

图2表示血浆在二维电泳后银染；A：正常组血浆双向电泳图，B：重性抑郁组血浆双向电泳图，正常血浆的标记区域中显示存在过量的蛋白质，而抑郁症血浆的标记区域中显示蛋白质的数量减少；

图3表示使用MALDI-TOF分析仪得到的图2标记区域中蛋白质经胰蛋白酶处理的肽的质谱，以及肽片段中肽的氨基酸序列，一级质谱图； 

图4表示图3相应的二级质谱图；

图5表示图3相应的二级质谱图；

图6表示图3相应的二级质谱图；

图7表示PEDF在正常对照组、精神分裂症组、双向情感障碍组及抑郁症组中PEDF的表达变化；

图8表示PEDF标准溶液和ELISA反应后的光密度测量值。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1，蛋白质组学分析的血浆的预处理。

如图1所示，将要应用于蛋白质组学分析的血浆样品与正常血浆对照，然后去除7种高丰度蛋白（Agilent），Speed Vac对血浆样品进行浓缩，再采用TCA法对浓缩后样品进行除盐、纯化，最后沉淀为干粉备用(在后面的实施例中溶解后再进行的实验)。

实施例2，由正常人与抑郁症患者获得的血浆中发生变化的蛋白质群的研究。