[发明专利]一种蛇舌草多糖提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药领域，尤其涉及一种蛇舌草多糖的提取方法。

背景技术

白花蛇舌草为茜草科一年生草本植物白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.)的干燥全草，广泛分布于我国的广东、广西、福建及长江以南各省市，夏秋季采集、洗净、鲜用或晒干、切段。药理研究表明：本药材具有抗菌、增强免疫功能、抗肿瘤、抗衰老等多种功效。多糖是白花蛇舌草的免疫活性成分，抗感染作用较强，并可能有增强肾上腺皮质功能的作用，此与炎症反应和免疫反应有关。蛇舌草黄酮小分子制剂已经进入国家药典标准，但其多糖尚未有一个标准化的适于生产提取方法。

发明内容

鉴于上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提出一种蛇舌草多糖提取方法，使其更适于工业标准化生产。

本发明的目的将通过以下技术方案得以实现：

一种蛇舌草多糖提取方法，包括如下步骤：

步骤一，将蛇舌草切割成5厘米～10厘米段，使用乙酸乙酯对蛇舌草进行脱脂浸泡过夜；

步骤二，使用50摄氏度～60摄氏度的水浸泡步骤一脱脂后沥干的蛇舌草药材两次，每次4个小时，水量以完全浸没药材为准，合并浸泡提取液；

步骤三，浓缩步骤二所得提取液至挂浆，加入95％纯度的药用乙醇至浓缩液中乙醇的含量为75％～85％，4摄氏度冷藏，静置12小时～15小时，过滤并用药用乙醇冲洗滤渣，所得滤渣即是多糖。

本发明的突出效果为：提供了一种蛇舌草多糖的工业标准化生产方法，其工艺简单，成本低廉，操作方便。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例：

本实施例一种蛇舌草多糖提取方法，包括如下步骤：

步骤一，将蛇舌草切割成5厘米～10厘米段，使用乙酸乙酯对蛇舌草进行脱脂浸泡过夜；

步骤二，使用50摄氏度～60摄氏度的水浸泡步骤一脱脂后沥干的蛇舌草药材两次，每次4个小时，水量以完全浸没药材为准，合并浸泡提取液；

步骤三，浓缩步骤二所得提取液至挂浆，加入95％纯度的药用乙醇至浓缩液中乙醇的含量为75％～85％，4摄氏度冷藏，静置12小时～15小时，过滤并用药用乙醇冲洗滤渣，所得滤渣即是多糖。

对所得多糖用MTT法进行细胞毒试验并与直接水煮所得蛇舌草浸膏进行比较：取肿瘤细胞悬液(4×10)180μl，加于96孔培养板，在5％CO2、37℃条件下(培养条件下同)预培养24h，更换其中的150μl培养基后，并加入含有不同浓度的工艺优化后所得的多糖的培养基各20μl，分别以不加样品的培养基为对照，继续培养48h。用MTT法分别测定OD值，计算相对增殖率。

结果显示所得多糖具有一定的活性，且多糖活性大于直接水煮所得蛇舌草浸膏，同时在实验中还发现，多糖并不是直接杀死肿瘤细胞，而是通过增强细胞免疫力的方式抑制肿瘤细胞生长繁殖。

本实施例的突出效果为：提供了一种蛇舌草多糖的工业标准化生产方法，其工艺简单，成本低廉，操作方便。

本发明尚有多种实施方式，凡采用等同变换或者等效变换而形成的所有技术方案，均落在本发明的保护范围之内。