[发明专利]一种测定乳制品中乳铁蛋白的高效亲和色谱法无效
申请号: | 201210302931.8 | 申请日: | 2012-08-24 |
公开(公告)号: | CN102854262A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 宋薇 | 申请(专利权)人: | 青岛谱尼测试有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266061 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 测定 乳制品 铁蛋白 高效 亲和 色谱 | ||
1.一种测定乳制品中乳铁蛋白的高效亲和色谱法,其特征在于:所述测定方法包括如下的步骤:
试样经水提取,提取液经有机酸调节pH值至4.6沉淀酪蛋白后,离心,采用亲和层析柱分离,用配置二极管阵列检测器的高效液相色谱系统测定含量。
2.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,所述的有机酸为甲酸或乙酸。
3.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,所述的亲和层析柱为肝素亲和层析柱。
4.根据权利要求3所述的测定方法,其特征在于,所述的肝素亲和层析柱优选GE Healthcare Hitrap Heparin HP柱,1mL或5mL。
5.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,所述的高效液相色谱测定系统的流动相为A:0.01mo l/L,pH=7的磷酸钠缓冲溶液,B:0.01mol/L,pH=7的含有1mol/L的氯化钠的磷酸钠缓冲溶液;二元梯度洗脱:0-5min,采用体积比为100%流动相A;5-12min,由体积比为100%流动相A线性转换为100%流动性B;12-19min,采用体积比为100%流动相B;19-20min,由体积比为100%流动相B线性转换为100%流动性A,保持5min。
6.根据权利要求1或5所述的测定方法,其特征在于,所述的高效液相色谱系统的色谱条件还包括:流动相流速0.4-1.0mL/min;检测波长280nm;柱温25-30℃,进样体积10-50μL。
7.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,所述的乳制品为婴幼儿配方食品、牛奶、羊奶、人乳、还原乳或含乳饮料。
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